兼具止血和促伤口修复的纤维蛋白凝胶的制备、表征及生物学评价

发布时间：2021-02-24 08:27

　　如何快速有效地止血是手术中的一个重要步骤,在手术中,对伤口及时止血,不仅能提高手术的成功率,而且能减少术后的并发症。随着科技的发展,可吸收止血材料的应用越来越多,但是这些可吸收止血材料只起到止血作用,不能补上缺失的细胞,伤口容易形成凹陷的疤痕,痊愈时间长,故含有种子细胞的止血材料是一个新的研究方向。本文主要研究的是一种兼具止血和促伤口修复的生物材料,将纤维蛋白原和凝血酶制备成纤维蛋白凝胶,通过材料学表征、止血评价、细胞相容性和包裹骨髓间充质干细胞（BMSC）评价筛选出合适的比例;然后将BMSC和血管内皮生长因子（VEGF）同时装载于凝胶内部,希望使这种包裹BMSC和VEGF的水凝胶在止血的同时,将BMSC诱导为内皮细胞,从外界引入内皮细胞,加速伤口的愈合及修复。将纤维蛋白原溶液和凝血酶溶液按一定比例混合,模拟人体凝血反应的最后阶段,用凝血酶激活纤维蛋白原形成纤维蛋白,纤维蛋白再交联,最后形成纤维蛋白凝胶,成功制备出1:1、1:3、1:5三种不同比例的纤维蛋白凝胶,测胶呈半透明状,具有一定韧性;通过溶胀度测定发现,1:3的溶胀度最大;通过HE染色发现,凝胶内部为多孔纤维状网络结构;通过扫... 

【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
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第1章 绪论
    1.1 止血辅料简介
        1.1.1 止血辅料的历史
        1.1.2 可吸收止血材料
        1.1.3 可吸收止血材料的分类
    1.2 水凝胶材料
        1.2.1 水凝胶的定义
        1.2.2 水凝胶的应用
    1.3 纤维蛋白凝胶
    1.4 间充质干细胞和血管内皮生长因子的介绍
        1.4.1 间充质干细胞
        1.4.2 血管内皮生长因子
    1.5 论文的主要研究内容、目的与意义及技术路线图
        1.5.1 论文的研究目的与意义
        1.5.2 论文的主要研究内容
        1.5.3 论文的技术路线图
第2章 实验方法及原理
    2.1 纤维蛋白凝胶的制备原理及方法
        2.1.1 纤维蛋白凝胶的制备原理
        2.1.2 纤维蛋白凝胶的制备方法及流程
    2.2 纤维蛋白凝胶材料学表征方法及原理
        2.2.1 溶胀度
        2.2.2 HE染色
        2.2.3 扫描电子显微镜
    2.3 纤维蛋白凝胶表面生物相容性评价方法及原理
        2.3.1 特异性免疫荧光染色
        2.3.2 细胞体外静态培养
        2.3.3 血小板粘附
        2.3.4 静态全血试验
        2.3.5 凝血时间（APTT）
    2.4 纤维蛋白凝胶包裹骨髓间充质干细胞的评价方法及原理
        2.4.1 包裹骨髓间充质干细胞静态培养
        2.4.2 不同VEGF的添加方式对包裹的BMSC的影响
    2.5 乳鼠创伤实验
第3章 纤维蛋白凝胶的制备及其材料学表征
    3.1 试剂与仪器
        3.1.1 实验试剂
        3.1.2 试剂配置
        3.1.3 实验仪器
    3.2 纤维蛋白凝胶的制备
        3.2.1 纤维蛋白原来源的选择
        3.2.2 成胶判断
        3.2.3 比例的筛选
        3.2.4 纤维蛋白凝胶的制备
    3.3 纤维蛋白凝胶的材料学表征
        3.3.1 溶胀度检测结果
        3.3.2 HE染色
        3.3.3 扫描电镜检测结果
    3.4 本章小结
第4章 纤维蛋白凝胶的止血评价
    4.1 试剂与仪器
        4.1.1 实验试剂
        4.1.2 试剂配置
        4.1.3 实验仪器
    4.2 纤维蛋白凝胶表面的止血评价
        4.2.1 血小板粘附实验
        4.2.2 静态全血试验
        4.2.3 活化部分凝血活酶时间检测结果
    4.3 乳鼠创伤实验
    4.4 本章小结
第5章 纤维蛋白凝胶的细胞相容性评价
    5.1 试剂与仪器
        5.1.1 实验试剂
        5.1.2 试剂配置
        5.1.3 实验仪器
    5.2 纤维蛋白凝胶表面的细胞相容性评价
        5.2.1 内皮细胞的体外静态培养结果
        5.2.2 平滑肌细胞的体外静态培养结果
    5.3 纤维蛋白凝胶包裹骨髓间充质干细胞的静态培养
        5.3.1 凝胶中BMSC的细胞形态
        5.3.2 凝胶中BMSC的细胞活性
    5.4 样品筛选
    5.5 本章小结
第6章 纤维蛋白凝胶的功能化初探
    6.1 试剂与仪器
        6.1.1 实验试剂
        6.1.2 试剂配置
        6.1.3 实验仪器
    6.2 不同VEGF的添加方式对纤维蛋白凝胶中包裹的BMSC的影响
        6.2.1 凝胶中的BMSC的细胞形态
        6.2.2 凝胶中的BMSC的细胞活性
        6.2.3 凝胶中的BMSC的细胞分化情况
    6.3 本章小结
结论
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果



本文编号：3049096