奈比洛尔通过AMPK/NOX/ROS抑制高糖诱导HK-2细胞上皮-间质转化

发布时间：2021-03-04 23:28

　　目的:研究奈比洛尔抑制高糖诱导人肾小管上皮细胞（HK-2）上皮-间质转化（EMT）的机制。方法:不同浓度奈比洛尔、DPI（NOX抑制剂）、AMPK抑制剂化合物C、AMPK激动剂AICAR预处理1.5 h后,加入高糖(30 mmol·L^-1)刺激HK-2细胞48 h,倒置显微镜观察细胞形态,荧光探针法检测细胞内活性氧（ROS）,MTT法检测细胞增殖,Western Blot检测细胞蛋白表达。结果:高糖降低HK-2细胞p-AMPK/AMPK,增加NOX4和p22^phox蛋白表达,升高细胞内ROS水平,诱导EMT发生。奈比洛尔10和20μmol·L^-1抑制高糖诱导EMT,且10μmol·L^-1奈比洛尔对HK-2细胞增殖无影响。奈比洛尔和DPI减少高糖诱导HK-2细胞NOX4和p22^phox蛋白表达,降低ROS水平,抑制EMT。奈比洛尔与AICAR增加p-AMPK/AMPK,抑制EMT,此作用可被化合物C拮抗。结论:奈比洛尔通过AMPK/NOX/ROS通路改善高糖诱导HK-2细胞EMT... 

【文章来源】：中国新药杂志. 2020,29(17)北大核心

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

高糖(30 mmol·L-1葡萄糖,48 h)诱导HK-2细胞EMT

如图2所示,奈比洛尔1和5 μmol·L-1预处理1.5 h对高糖诱导HK-2细胞EMT无显著影响,而10和20 μmol·L-1则明显抑制(P<0.001),但2个浓度之间无显著性差异。结果提示,奈比洛尔可抑制高糖诱导HK-2细胞EMT。3 奈比洛尔对HK-2细胞增殖的影响

MTT实验显示,奈比洛尔1,5和10 μmol·L-1处理后HK-2细胞A值与空白组相比无显著性差异,提示上述浓度奈比洛尔对细胞增殖无明显影响。奈比洛尔20 μmol·L-1有降低HK-2细胞A值趋势,但尚未达统计学差异(见图3)。结合不同浓度奈比洛尔对高糖诱导HK-2细胞EMT实验结果,课题组选用奈比洛尔10 μmol·L-1进一步探讨其机制。


本文编号：3064130