包载miR-139-5p的EpCAM适配体功能化阳离子脂质体纳米颗粒的制备及对结直肠癌靶向治疗作用的研究

发布时间：2021-03-07 17:42

　　结直肠癌（CRC）是全球最常见的癌症之一,每年约有70万人死于CRC。约有50%的CRC患者在诊断时或治疗后复发时出现局部或远处转移。具有远处转移的CRC患者五年生存率小于10%。目前对于CRC的治疗主要是外科手术、化疗、放疗和靶向治疗。MicroRNA（miRNA）在多种生物学过程中起着至关重要的作用。MiRNA作为治疗剂面临的主要挑战是它们在血浆中的快速降解、短半衰期和脱靶效应。其中,miR-139-5p被认为是在CRC中过表达的抑癌基因,有助于减缓癌症的进展。在此课题中,我们开发了一种基于阳离子脂质体的纳米粒子药物递送系统,该药物递送系统负载了 miR-139-5p（miR-139-5p-HSPC/DOTAP/Chol/DSPE-PEG2000-COOH纳米粒子,MNPs）,并用上皮细胞粘附分子（EpCAM）适配体（Apt）进行了表面修饰（miR-139-5p-EpCAM Apt-HSPC/DOTAP/Chol/DSPE-PEG2000-COOH纳米粒子,MANPs）,用于CRC的靶向治疗。MANPs的尺寸为150.3±8.8 nm,表面电势为37.8±3.2 mV,具有圆形外观... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３．２游离ＥｐＣＡＭ?Ａｐｔ与ＡＮＰｓ的电泳图??Ｆｉｇ．?３．２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｆｒｅｅ?ＥｐＣＡＭ?Ａｐｔ?ａｎｄ?ＡＮＰｓ??

华东理工大学硕士学位论文?第１９页??与１９个碱基对（ｂｐ）大小标记的迁移相匹配，而ＡＮＰｓ滞留于原点，表明了?ＥｐＣＡＭ?Ａｐｔ??与ＮＰｓ的成功连接。??２０ｂｐ＾?＾１０ｂｐ??图３．２游离ＥｐＣＡＭ?Ａｐｔ与ＡＮＰｓ的电泳图??Ｆｉｇ．?３．２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｆｒｅｅ?ＥｐＣＡＭ?Ａｐｔ?ａｎｄ?ＡＮＰｓ??３．４．２?ＡＮＰｓ载基因能力的考察??对于ＮＬＰ与ｍｉＲ－１３９－５ｐ的比例问题，本章设计了不同的Ｎ／Ｐ比进行比较实验，并??通过琼脂糖凝胶电泳观察ＡＮＰｓ对ｍｉＲ－１３９－５ｐ的包载效果。如图３．３所示，当Ｎ／Ｐ为０、??１、２、５时，ＭＡＮＰｓ中的ｍｉＲ－１３９－５ｐ迁移出明显的条带；当Ｎ／Ｐ大于等于１０的情况下，??ＡＮＰｓ均能完全包载ｍｉＲ－１３９－５ｐ。通过加入曲拉通试剂溶解脂质材料后，包载的??ｍｉＲ－１３９－５ｐ会游离出来，进一步证明了?ＡＮＰｓ对ｍｉＲ－１３９－５ｐ的包载。???Ｎ＾Ｐ???０?１?２?５?１０?２０?３０?３０（ｌｙｓｅｄ）??图３．３?ＭＡＮＰｓ在不同的Ｎ／Ｐ条件下电泳图??Ｆｉｇ．?３．３?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ＭＡＮＰｓ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?Ｎ／Ｐ?ｒａｔｉｏｓ??３．４．３?ＭＮＰｓ?及?ＭＡＮＰｓ?的表征??在证明了靶向性脂质体纳米颗粒制备成功且能够在Ｎ／Ｐ大于１０时包载ｒｍＲ－１３９－５ｐ??后，接下来，本章对ＭＮＰｓ和ＭＡＮＰｓ的粒径、电势和ＰＤＩ进行了表征。如图３．４?Ａ所??示，在连接ＥｐＣＡＭ?Ａｐｔ之前，脂质体纳米颗粒大小为１３６．Ｕ４．８?ｎｍ，ＰＤＩ为０．２８９进０１９，

图３．４?ＭＮＰｓ及ＭＡＮＰｓ的表征

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
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本文编号：3069535