内皮素-1增强大鼠初级感觉神经元中的酸敏感离子通道电流

发布时间：2021-03-08 14:13

　　目的:内皮素-1（ET-1）是一种内源性血管活性肽,已发现在外周疼痛信号传导中起着重要作用。酸敏感离子通道（ASICs）是细胞外H⁺的感受器,介导组织酸化引起的疼痛。初级感觉神经元中ET-1和ASICs之间是否存在相互作用尚不清楚。本项目研究ET-1对大鼠背根神经节（DRG）神经元ASICs活动的增强作用。方法:在DRG神经元和共表达ASIC3与ET_A受体的CHO细胞,采用膜片钳电生理技术记录DRG神经元的电生理活动,同时动物行为学检测阿米洛利或APETx2阻断ASICs对ET-1诱发的痛觉过敏的影响。结果:在全细胞电压钳记录中,当AMG9810阻断TRPV1通道激活的条件下,快速给予DRG神经元一个pH 6.0的酸性刺激,可引起ASIC电流。预处理ET-1（1-100 nM）剂量依赖性地增加H⁺诱发的ASIC电流,EC₅₀值为7.42±0.21 nM。预处理ET-1（30 nM）可使H⁺的浓度-效应曲线向上移动,最大电流反应增加61.11%±4.33%。在DRG神经元和共表达... 

【文章来源】：湖北科技学院湖北省

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ET-1以浓度依赖性增强大鼠DRG神经元的H+门控电流

2图2.ET-1对H+浓度-效应曲线的影响图A在(30nM)ET-1对DRG神经元给药和不处理的情况下，不同的低pH值会引起不同峰度电流。图B（30nM）ET-1未处理(〇)和预先添加(●)时ASIC活化的H+浓度-反应曲线。预先加入ET-1的使H+的浓度-反应曲线向上平移。每个点表示7-10个神经元的平均值±标准差。在没有ET-1的情况下，pH5.0单独使用时，所有峰值电流均归一化标准为最大激活峰值电流（标为*）该图显示了用Hill方程拟合的平均数据

2图3.ET-1增强H+门控电流的受体和细胞内信号转导机制图A中的电流曲线图和(B)中的柱状图显示，仅ET-1(30nM)预先处理2min，就能增强IpH6.0。ET-1增强IpH6.0的作用被ETAR特异性拮抗剂BQ-123(100nM)联合应用所阻断，而没有被EBR特异性拮抗剂BQ-788(100nM)所阻断。（**P<0.01，ET-1组与空白对照组，##P<0.01，BQ-123+ET-1组与ET-1组单独比较，每组n=8个）图C中的电流曲线和(D)中的柱状图显示了ET-1(30nM)对IpH6.0的影响，其中记录电极中填充正常的细胞内液。难水解的GDP类似物GDP-β-S(500μM),或PKC抑制剂GF109203X溶解在内液中。通过胞内透析GDP-β-S或GF109203X完全的阻断由ET-1激发IpH6.0的增强作用。（**P<0.01,与普通的细胞内液相比，n=8）

【参考文献】：
期刊论文
[1]激活PPAR-γ对妊娠高血压大鼠模型ET-1/ETAR信号通路的影响[J]. 石紫云,张雅,赵静,刘飞飞,袁晓华.  山西医科大学学报. 2020(02)

博士论文
[1]内皮素-1引起搔痒的分子机制研究[D]. 季文进.南方医科大学 2013



本文编号：3071187