蛋氨酸脑啡肽联合紫杉醇对肺癌细胞A549的增殖和凋亡的影响
发布时间：2021-03-09 22:46
目的:肺癌是最常诊断的癌症,也是全球癌症相关死亡的主要原因。大约85%的肺癌患者具有非小细胞型肺癌的组织学特征,特点是增殖周期短、转移活性强、死亡率高。临床上,只有一小部分的非小细胞型肺癌患者能够在早期诊断,超过60%的肺癌患者在诊断时就出现了局部晚期或转移性疾病,手术切除已不再是最佳选择,此时肺癌患者的主要治疗方法是常规化学疗法和放射疗法。紫杉醇（Paclitaxel,PTX）是临床上最常见的抗癌药物之一,常用作非小细胞型肺癌临床化疗的一线抗癌药物。PTX抗肿瘤的机制是通过结合微管蛋白,稳定非功能性的微管束来阻断正常的有丝分裂和纺锤体发育,从而达到抑制肿瘤细胞生长的效果。然而,PTX的使用往往会带来严重副作用和多药耐药性,这些缺点降低了其抗肿瘤的作用。因此探索治疗非小细胞型肺癌的新型疗法具有十分重要的意义。蛋氨酸脑啡肽（Methionine enkephalin,MENK）是衍生自肾上腺素原激素脑啡肽的内源性阿片样五肽,是免疫系统和神经内分泌系统之间的重要调节因子,它与阿片受体（OGFr）结合后具有直接的抗肿瘤活性。根据以往的研究报道,MENK可抑制胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肝...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
单药组及联合用药组对A549细胞增殖的抑制作用(n=3)
中国医科大学硕士学位论文10图2.MENK与PTX联合应用48h的剂量-效应曲线、Fa-CI曲线Fig.2CombinationofMENKandPTXfor48hdose-effectcurve,Fa-CIcurve3.3Hoechst33258染色法观察各组细胞凋亡形态及凋亡率Hoechst33258试剂是一种可以透过细胞膜的蓝色荧光染料，染色之后，空白对照组的细胞形状为圆形或椭圆形，比较规则，颜色呈现为均匀的淡蓝色，基本未观察到细胞凋亡的发生。与空白对照组相对比，MENK组和PTX组的部分细胞呈现亮蓝色，细胞核固缩、碎裂、着色浓染、形状不规则，能观察到不同程度的细胞凋亡的发生。而MENK与PTX联合应用组则有大量细胞呈现核固缩，形成若干个形状不规则的碎片，着色浓染，观察到细胞凋亡的数量最多。根据倒置荧光显微镜下的计数结果，空白对照组的凋亡率为0.8%，MENK组的凋亡率为14%，PTX组的凋亡率为21%，而MENK与PTX联合用药组的凋亡率是34%。Hoechst33258荧光染色实验结果初步表明，各实验组在给药48h后的细胞凋亡率均有升高。与单药组相比，MENK联合PTX组的细胞凋亡数量最多，凋亡率升高最明显，且差异具有统计学意义。（见图3）
中国医科大学硕士学位论文11图3.荧光显微镜观察细胞凋亡形态及各组细胞凋亡率Fig.3Themorphologyofapoptoticcellsobservedbyfluorescencemicroscopyandapoptosisrateofeachgroup.Note：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0013.4流式细胞术AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡为了进一步确定各实验组在给药培养48h后的细胞凋亡情况，我们通过流式细胞术来进行检测。各组细胞经过流式凋亡试剂盒染色后，上机进行检测。结果显示：空白对照组的细胞凋亡率为1.53%，MENK组、PTX组的细胞凋亡率分别为6.23%、6.04%，而MENK与PTX联合用药组的细胞凋亡率是13.22%。与空白对照组相比，各实验组的细胞凋亡率均明显升高，并且MENK与PTX联合用药组的细胞凋亡率要高于单独用药组，差异具有统计学意义。这些数据表明，MENK和PTX均能诱导细胞凋亡，并且两者联合应用后诱导细胞凋亡的作用更强。（见图4）
【参考文献】：
期刊论文
[1]Multiline treatment of advanced squamous cell carcinoma of the lung: A case report and review of the literature[J]. Xin Yang,Ping Peng,Li Zhang. World Journal of Clinical Cases. 2019(14)
[2]紫杉醇在非肿瘤性疾病中应用的研究进展[J]. 吴珊珊,刘平先,刘斌. 现代药物与临床. 2017(09)
[3]Current issues and future perspectives of gastric cancer screening[J]. Chisato Hamashima. World Journal of Gastroenterology. 2014(38)
[4]Opioid growth factor and the treatment of human pancreatic cancer:A review[J]. Ian S Zagon,Patricia J McLaughlin. World Journal of Gastroenterology. 2014(09)
本文编号：3073602
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
单药组及联合用药组对A549细胞增殖的抑制作用(n=3)
中国医科大学硕士学位论文10图2.MENK与PTX联合应用48h的剂量-效应曲线、Fa-CI曲线Fig.2CombinationofMENKandPTXfor48hdose-effectcurve,Fa-CIcurve3.3Hoechst33258染色法观察各组细胞凋亡形态及凋亡率Hoechst33258试剂是一种可以透过细胞膜的蓝色荧光染料，染色之后，空白对照组的细胞形状为圆形或椭圆形，比较规则，颜色呈现为均匀的淡蓝色，基本未观察到细胞凋亡的发生。与空白对照组相对比，MENK组和PTX组的部分细胞呈现亮蓝色，细胞核固缩、碎裂、着色浓染、形状不规则，能观察到不同程度的细胞凋亡的发生。而MENK与PTX联合应用组则有大量细胞呈现核固缩，形成若干个形状不规则的碎片，着色浓染，观察到细胞凋亡的数量最多。根据倒置荧光显微镜下的计数结果，空白对照组的凋亡率为0.8%，MENK组的凋亡率为14%，PTX组的凋亡率为21%，而MENK与PTX联合用药组的凋亡率是34%。Hoechst33258荧光染色实验结果初步表明，各实验组在给药48h后的细胞凋亡率均有升高。与单药组相比，MENK联合PTX组的细胞凋亡数量最多，凋亡率升高最明显，且差异具有统计学意义。（见图3）
中国医科大学硕士学位论文11图3.荧光显微镜观察细胞凋亡形态及各组细胞凋亡率Fig.3Themorphologyofapoptoticcellsobservedbyfluorescencemicroscopyandapoptosisrateofeachgroup.Note：*P<0.05；**P<0.01；***P<0.0013.4流式细胞术AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡为了进一步确定各实验组在给药培养48h后的细胞凋亡情况，我们通过流式细胞术来进行检测。各组细胞经过流式凋亡试剂盒染色后，上机进行检测。结果显示：空白对照组的细胞凋亡率为1.53%，MENK组、PTX组的细胞凋亡率分别为6.23%、6.04%，而MENK与PTX联合用药组的细胞凋亡率是13.22%。与空白对照组相比，各实验组的细胞凋亡率均明显升高，并且MENK与PTX联合用药组的细胞凋亡率要高于单独用药组，差异具有统计学意义。这些数据表明，MENK和PTX均能诱导细胞凋亡，并且两者联合应用后诱导细胞凋亡的作用更强。（见图4）
【参考文献】：
期刊论文
[1]Multiline treatment of advanced squamous cell carcinoma of the lung: A case report and review of the literature[J]. Xin Yang,Ping Peng,Li Zhang. World Journal of Clinical Cases. 2019(14)
[2]紫杉醇在非肿瘤性疾病中应用的研究进展[J]. 吴珊珊,刘平先,刘斌. 现代药物与临床. 2017(09)
[3]Current issues and future perspectives of gastric cancer screening[J]. Chisato Hamashima. World Journal of Gastroenterology. 2014(38)
[4]Opioid growth factor and the treatment of human pancreatic cancer:A review[J]. Ian S Zagon,Patricia J McLaughlin. World Journal of Gastroenterology. 2014(09)
本文编号：3073602
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