酮咯酸氨丁三醇对映异构体的高效液相色谱法拆分及其含量测定

发布时间：2021-03-21 18:27

　　目的建立高效液相色谱法拆分并测定酮咯酸氨丁三醇对映异构体（S-KT与R-KT）的含量。方法采用CHIRALPAK AGP色谱柱（0.4 cm×10 cm,5 mm）,以10 mmol·L^-1乙酸铵（pH 5.5）-异丙醇（97∶3）为流动相,检测波长324 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温25℃,进样量5μL。结果 S-KT与R-KT的分离度为2.8。S-KT与R-KT均在3～60μg·mL^-1与峰面积线性关系良好（r均为0.9999）。S-KT和R-KT的低、中、高3个浓度平均回收率分别为96.9%、99.5%、101.3%和97.1%、100.2%、102.1%,RSD分别为1.0%、0.70%、0.50%和2.1%、0.60%和0.30%。结论所建立的方法经方法学验证可用于拆分和测定S-KT与R-KT。 

【文章来源】：中南药学. 2020,18(06)

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

KT的化学结构

取“2.1”项下KT消旋体对照品溶液、S-KT对照品溶液、R-KT对照品溶液、供试品溶液与系统适用性试验溶液，进样测定，见图2。结果表明，在选定的色谱条件下，S-KT与R-KT峰能较好地分离，分离度为2.8；理论板数均大于2000。2.3 线性关系考察

流动相的p H值对拆分选择性的影响显著。AGP色谱柱应用的p H范围是4～7,AGP的等电点是2.7，因此在其应用p H值范围内蛋白分子结构中的氨基酸呈离子型状态，该离子结构提供手性作用位点，利用手性药物对映体与这些作用位点间产生的氢键、疏水效应、静电作用等而达到拆分[7-12]。通过调整流动相中乙酸铵的p H值发现，随着流动相p H值降低，S-KT和R-KT分离度增加，保留时间延长，变化趋势见图3。推测其原因，可能是流动相的p H值降低，使得带电基团数目增加，手性药物与AGP固定相作用增强，其保留值与选择性也增加。随着流动相p H值降低，S-KT和R-KT色谱峰也逐渐展宽，理论板数降低。通过比较在不同p H值时S-KT和R-KT的分离度与理论板数，最终选择p H值为5.5作为流动相的p H值。3.3 流动相比例对分离的影响

【参考文献】：
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本文编号：3093339