V_E的β-乳球蛋白包被物制备及其抗氧化性和转运吸收研究

发布时间：2017-04-16 02:14

  本文关键词：V_E的β-乳球蛋白包被物制备及其抗氧化性和转运吸收研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：维生素E(V_E)是人体必需的营养物质之一,也是机体中最有效的抗氧化剂,然而V_E不溶于水,并且紫外线、碱和氧都能迅速破坏V_E,使其难以在食品工业中很好的应用。微胶囊化能够保护敏感组分免受环境的破环。β-乳球蛋白(β-Lg)是一种重要的水溶性蛋白,具有较强的配体结合能力,并能显著提高这些配体的稳定性和生物利用率。本文以β-Lg为载体,制备了β-Lg-V_E包合物并研究了包合物的抗氧化性和转运吸收。1.响应面法优化V_E包被物的制备采用了响应面分析法对β-Lg包被V_E、β-Lg粗提物包被V_E、乳清蛋白包被V_E的最佳工艺条件进行研究。实验结果如下:(1)β-Lg包被V_E的最优条件为:质量比例5:1,磁力作用时间45min,热激温度49℃,p H为6.27(纯水),在此条件下V_E的包被率为43.47%。(2)β-Lg粗提物包被V_E的最优条件为:质量比例19:1,磁力作用时间49min,热激温度72℃,在此条件下V_E的包被率为68.5%。(3)乳清蛋白包被V_E的最优条件为:质量比例14:1,磁力作用时间54min,热激温度83℃,在此条件下V_E的包被率为57.54%。透射电镜结果表明:包被物呈球形、分散均匀,在内部有亮白比较规则的物质。β-Lg、β-Lg粗提物、乳清蛋白与V_E的包被物的粒径分别为0.17~3μm、0.25~0.35μm和0.25~0.45μm。红外光谱结果表明:包被物的走势和峰值与包被材料几乎相同,没有形成新的吸收峰。2.β-Lg-V_E包被物对发育期雄性小鼠抗氧化能力的影响采用小鼠试验,研究不同状态的V_E对发育期雄性小鼠血清睾酮、血清总抗氧化能力、脑超氧化物歧化酶、肝脏超氧化物歧化酶、肝脏过氧化氢酶和睾丸过氧化氢酶六种抗氧化指标的影响。结果表明:包被物组的六种抗氧化指标显著高于空白、V_E及酶解组(P0.05);随着小鼠饲喂时间的增加,包被物组小鼠血清中睾酮含量有所增加,但差异不显著(P0.05);其他五种的抗氧化指标存在显著性的差异(P0.05);V_E组及酶解组的抗氧化活性也有所增加,差异不显著(P0.05)。3.小鼠小肠组织和肠上皮细胞中ABCA1、SR-BI和Pep T1 m RNA表达情况通过体内试验(饲养小鼠)和体外试验(细胞培养),采用定量PCR法比较小鼠小肠组织中ABCA1、SR-BI和Pep T1 m RNA表达水平,比较分析包被物在小鼠小肠中的吸收转运方式。结果表明:包被物组中的ABCA1 m RNA表达量均显著高于其他组(P0.05);包被物组小鼠小肠组织中SR-BI m RNA表达量均极显著高于空白组和V_E组(P0.01),显著高于酶解包被物组(P0.05);包被物组第一周和第二周小鼠小肠组织中Pep T1 m RNA均极显著高于酶解包被物组(P0.01),包被物组第三周小鼠小肠组织中Pep T1 m RNA均极显著高于其他组(P0.01)。随着饲喂时间的增加,小鼠小肠组织中ABCA1、SR-BI和Pep T1 m RNA表达量均无显著差异(P0.05)。小鼠肠上皮细胞中包被物组ABCA1、SR-BI以及Pep T1 m RNA的表达量均显著的高于空白组以及V_E组(P0.05)。
【关键词】：V_E β-乳球蛋白 包被 肠上皮细胞 转运蛋白
【学位授予单位】：安徽农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R943;R96
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-9
• 文献综述9-15
• 1 引言15-16
• 2 材料与方法16-25
• 2.1 试验材料16-17
• 2.1.1 试验动物和细胞来源16
• 2.1.2 主要试剂16-17
• 2.1.3 主要仪器设备17
• 2.2 试验方法17-25
• 2.2.1 V_E包被物制备方法17-18
• 2.2.2 检测方法18
• 2.2.3 试验设计18-25
• 3 结果与分析25-53
• 3.1 V_E的标准曲线25
• 3.2 不同制备方法对包被效果的影响25-26
• 3.3 β-Lg包被V_E试验结果26-32
• 3.3.1 β-Lg与V_E质量比例对V_E包被效果的影响26
• 3.3.2 磁力作用时间对V_E包被效果的影响26-27
• 3.3.3 热激温度对V_E包被效果的影响27
• 3.3.4 pH对V_E包被效果的影响27-28
• 3.3.5 响应面优化结果分析28-31
• 3.3.6 最佳工艺条件的预测和验证31-32
• 3.4 β-Lg粗提物包被V_E试验结果32-36
• 3.4.1 β-Lg粗提物与V_E质量比例对V_E包被效果的影响32
• 3.4.2 磁力作用时间对V_E包被效果的影响32-33
• 3.4.3 热激温度对V_E包被效果的影响33
• 3.4.4 响应面优化结果分析33-36
• 3.4.5 最佳工艺条件的预测和验证36
• 3.5 乳清蛋白包被V_E试验结果36-41
• 3.5.1 乳清蛋白与V_E质量比例对V_E包被效果的影响36-37
• 3.5.2 磁力作用时间对V_E包被效果的影响37
• 3.5.3 热激温度对V_E包被效果的影响37-38
• 3.5.4 响应面优化结果分析38-41
• 3.6 透射电镜和红外光谱试验结果41-45
• 3.6.1 投射电镜试验结果分析41-43
• 3.6.2 红外光谱试验结果分析43-45
• 3.7 抗氧化能力各项指标结果45-48
• 3.7.1 血清睾酮检测45
• 3.7.2 血清总抗氧化能力（T-AOC）检测45-46
• 3.7.3 脑超氧化物歧化酶（SOD）检测46
• 3.7.4 肝脏超氧化物歧化酶（SOD）检测46-47
• 3.7.5 肝脏过氧化氢酶（CAT）检测47-48
• 3.7.6 睾丸过氧化氢酶（CAT）检测48
• 3.8 ABCA1、SR-BI和PepT1 mRNA的表达情况48-53
• 3.8.1 PCR 扩增48-49
• 3.8.2 荧光实时定量PCR扩增曲线49-50
• 3.8.3 小鼠小肠组织中ABCA1 mRNA表达情况50
• 3.8.4 小鼠小肠组织中SR-BI mRNA表达情况50-51
• 3.8.5 小鼠小肠组织中PepT1 mRNA表达情况51-52
• 3.8.6 小鼠肠上皮细胞中ABCA1、SR-BI和PepT1 mRNA表达情况52-53
• 4 讨论53-56
• 4.1 V_E包被物的制备53-54
• 4.2 不同状态V_E对发育期雄性小鼠抗氧化能力的影响54
• 4.3 ABCA1、SR-BI和PepT1 mRNA的表达情况54-56
• 5 结论56-57
• 5.1 β-Lg与V_E包被物制备的最优条件及其表征56
• 5.2 β-Lg-V_E包被物对发育期雄性小鼠抗氧化能力的影响分析56
• 5.3 ABCA1、SR-BI和PepT1 mRNA的表达情况分析56-57
• 参考文献57-63
• 致谢63-64
• 作者简介64-65
• 在校期间论文发表情况65

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