含RGD修饰的病毒样颗粒递送ICG靶向肿瘤的研究

发布时间：2021-03-24 15:44

　　目的:获取含RGD靶向肽的乙肝核心病毒样颗粒,为药物靶向纳米递送系统提供一种新型载体。方法:将实验室前期构建测序正确的含RGD修饰的乙肝核心病毒重组质粒转化入大肠杆菌BL21（DE3）中,单因素分析及正交试验探究重组蛋白最适表达条件。在最适表达条件下扩培,收集菌体超声破碎后离心,采用凝胶过滤层析、离子交换和蔗糖密度梯度离心进行纯化,利用透射电镜对形成的RGD-HBc VLPs的形态及稳定性进行鉴定。纯化的RGD-HBc VLPs利用其体外自组装的特性,将光敏剂ICG装载到颗粒的内部,通过静脉注射到4T1乳腺癌荷瘤小鼠,探究重组RGD-HBc VLPs作为纳米递送系统的靶向性。结果:RGD-HBc VLPs在温度32℃、IPTG0.5mmol/L、诱导4h时以可溶性蛋白的形式得到高效表达。经蔗糖密度梯度离心纯化后纯度到达95%以上。透射电镜下观察纯化的RGD-HBc VLPs形态、大小均一,直径约为32nm,通过近红外荧光活体成像证实了RGD-HBc作为纳米载体的靶向性。结论:经表达和纯化后,RGD-HBc VLPs具有较高的表达量和大小均一的形态外貌,近红外荧光活体成像证实具有较好的靶... 

【文章来源】：中国生物工程杂志. 2020,40(07)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

RGD-HBC重组菌株的生长曲线

扩大培养后收集菌液，离心后超声破碎，收集上清和沉淀，分别进行SDS-PAGE，如图4所示。从电泳结果可以看出，目的蛋白主要存在于超声破碎菌液的上清中，说明RGD-HBc重组蛋白以可溶性蛋白存在。图3 RGD-HBC重组菌在不同条件下的诱导表达

RGD-HBC重组菌在不同条件下的诱导表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]靶向整合素αvβ3药物的研究进展[J]. 刘莉,丁丽君.  中国新药与临床杂志. 2017(09)
[2]病毒样颗粒及其原核表达制备的研究进展[J]. 于天飞,张喜文,谢鹏宇,黎明,樊兴冬,闫冰.  生物学教学. 2016(10)

博士论文
[1]基于乙肝核心抗原病毒样颗粒及其衍生物颗粒性质的纯化和应用过程设计[D]. 李正军.中国科学院大学(中国科学院过程工程研究所) 2018

硕士论文
[1]乙型肝炎病毒核心抗原相关抗原的克隆、表达及抗体制备[D]. 王鹏.第二军医大学 2014



本文编号：3097979