萝卜硫素增强嵌合抗原受体T细胞抗肿瘤效应的研究

发布时间：2021-04-13 00:16

　　背景和目的恶性肿瘤是目前严重威胁人类健康的重大疾病之一,尽管传统的手术,放、化疗等治疗手段在临床中广泛应用,但仍然预后较差。免疫治疗作为抗肿瘤治疗领域的重大突破从而备受关注。其中嵌合抗原受体T细胞（Chimeric antigen receptors T cell,CAR-T）在体内展现出强大的抗肿瘤作用,已被FDA批准用于急性淋巴细胞白血病的治疗。然而由于肿瘤微环境的存在,使T细胞的功能受到抑制。其中一个主要因素是,肿瘤细胞表面程序性死亡蛋白配体-1（programmed death ligand 1,PD-L1）表达水平升高,与T细胞表面抑制型分子程序性死亡蛋白-1（programmed death-1,PD-1）相结合发挥免疫抑制功能,使T细胞处于耗竭状态。其重要机制是在T细胞发挥抗肿瘤作用的过程中,可分泌大量的干扰素-γ（Interferon-γ,IFN-γ）,IFN-γ在杀伤肿瘤的同时还可作为上游细胞因子诱导肿瘤细胞表面PD-L1分子的表达水平升高,与T细胞表面PD-1结合后抑制T细胞的功能从而发生免疫逃逸。因此,阻断PD-1/PD-L1通路,或抑制其表达成为恢复T细胞功能的... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度萝卜硫素对CD8+T细胞增殖活性的影响

1.2 MSLN-CAR 载体的构建和 MSLN-CAR T 细胞的制备将识别 MSLN 抗原的 MSLN-scFv 识别区连接至 CD28 和 CD3 的信号区（图2A），将其亚克隆入慢病毒载体中，测序验证 MSLN CAR 载体构建成功后，通过 293T 系统包装病毒及 T 细胞感染获得 MSLN-CAR T 细胞，采用流式细胞术检测效率（图 2B）。

72h后采用流式细胞术及免疫印迹检测PD-1表达（图3）。结果显示，与对照组相比，萝卜硫素处理后的 MSLN-CAR T 细胞表面 PD-1表达水平明显下调。说明萝卜硫素可显著降低 MSLN-CAR T 细胞表面 PD-1 的表达水平。图 3 萝卜硫素抑制 MLSN-CAR T 细胞表面 PD-1 表达A： 流式细胞术检测萝卜硫素处理后 MSLN-CAR T 细胞表面 PD-1 表达；B：免疫印迹检测萝卜硫素处理后 MSLN-CAR T 细胞表面 PD-1 表达。（**P＜ 0.01）


本文编号：3134247