溶血血小板活化因子乙酰基转移酶（LPAFAT）活性检测方法的比较

发布时间：2021-04-20 06:18

　　目的通过3种方法检测溶血血小板活化因子（platelet activating factor,PAF）乙酰基转移酶（Lyso-PAF acetyl transferase,LPAFAT）的活性并测定抑制剂对酶活性的抑制作用,比较这些方法的优劣。方法分别采用LC/MS/MS检测产物PAF,巯基反应探针结合分光光度法检测产物CoA-SH,TLC检测荧光标记产物法鉴定阳性和假阳性两种不同化合物对LPAFAT酶活性的抑制作用。结果 LC/MS/MS方法通过检测天然产物PAF的含量测定酶活性,抑制剂筛选结果准确可靠。巯基反应探针结合分光光度法虽然可以监测产物CoA-SH的含量,但反应体系中产生了大量干扰性的CoA-SH,因此并不能真实反映LPAFAT酶活性,亦不适于抑制剂活性筛选。TLC检测荧光标记产物法因底物NBD-Lyso PC结构已被修饰,不能代表天然底物的真实反应情况,可能存在错筛和漏筛。结论 LC/MS/MS检测产物PAF测定LPAFAT活性以及筛选抑制剂,方法灵敏,数据结果可靠,但成本较高。监测产物CoA-SH的含量不适合于测定LPAFAT酶活性。TLC检测荧光标记产物,操作简便,灵... 

【文章来源】：复旦学报(医学版). 2020,47(04)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
材料和方法
结果
讨论



本文编号：3149146