测定HepG2细胞内 13 C标记氨基酸及代谢物同位素丰度的方法

发布时间：2021-04-20 11:05

　　目的利用稳定同位素和气相色谱-质谱（gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS）衍生化法检测四君子汤（Sijunzi Decoction,SJZD）与丝裂霉素C（mitomycin C,MMC）联用对HepG2细胞内丙氨酸代谢的影响,探讨不同给药组与空白组HepG2细胞内丙氨酸代谢的差异及其意义。方法 HepG2细胞分4组（空白组、SJZD组、MMC组和SJZD与MMC联用组）,分别给¹³C标记丙氨酸(¹³C-labeled alanine,¹³C-Ala)培养12 h,回收细胞并加入体积分数为80%的甲醇溶液超声破碎后,离心取上清液,氮吹仪吹干,用体积分数为1%三甲基氯硅烷（trimethylchlorosilane,TMCS）的N-甲基-N-（三甲基甲硅烷基）三氟乙酰胺（N-methyl-N-（trimethylsilyl） trifluoroacetamide,MSTFA）衍生化,利用GC-MS检测并分析检测结果。结果 ¹³C-Ala同位素丰度在10.... 

【文章来源】：沈阳药科大学学报. 2020,37(11)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 仪器与材料
2 方法
    2.1 溶液的配制
    2.2 供试品的处理
    2.3 色谱条件
    2.4 质谱条件
3 结果
    3.1 氨基酸对照品的检测
    3.2 供试品的检测
4 试验条件优化与讨论
    4.1 衍生化条件的优化
    4.2 气相色谱条件的优化
    4.3 培养条件的优化



本文编号：3149559