藤黄酸HPMA聚合物前体药物的合成、表征及靶向性研究

发布时间：2021-04-22 09:34

　　为了克服传统化学药物治疗癌症由于药物本身缺乏靶向性而在体内随机分布引发严重的不良反应,本课题设计并研发一种新型具有高效、低毒、高选择性的主动-被动双重靶向抗癌聚合物胶束前药,实现药物在肿瘤组织中的富集和释放,继而杀死肿瘤细胞。课题选用亲水性的聚合物胶束载体N-（2-羟丙基）甲基丙烯酰胺（HPMA）与广谱抗肿瘤药物藤黄酸（Gambogic Acid,GA）以及靶向性分子D-半乳糖（D-Gal）/叶酸（FA）通过水解型连接臂酯键以及酰胺键偶联,形成两种具有不同靶向性的两亲性高分子共聚物,即D-半乳糖修饰的藤黄酸-HPMA聚合物前药（HPMA-D-Gal-GA）和叶酸修饰的藤黄酸-HPMA聚合物前药（HPMA-FA-GA）,在水中以分子间作用力为驱动力自组装成球形的核-壳结构,除了赋予其靶向功能之外,也增加药物溶解度,降低其毒副作用,外壳对药物起保护作用,提高药物的稳定性,并且达到缓释的目的。利用紫外-分光光度法测定藤黄酸聚合物胶束的聚合度,通过红外分光光度（IR）、核磁共振氢谱（¹H NMR）、质谱（MS）进行结构确证,通过凝胶渗透色谱（GPC）、透射电镜（TEM）、... 

【文章来源】：辽宁大学辽宁省 211工程院校

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
    0.1 靶向制剂研究概况
    0.2 靶向制剂设计的理论基础
    0.3 聚合物胶束研究概况
        0.3.1 聚合物前药应具备的条件
        0.3.2 聚合物前药的组成
        0.3.3 聚合物前药的优势
    0.4 常见的聚合物前药
        0.4.1 聚乙二醇前药（PEG化前药）
        0.4.2 聚-L-谷氨酸前药（PG）
        0.4.3 HPMA前药
    0.5 常见的聚合物连接臂
        0.5.1 水解型连接臂
        0.5.2 分支状连接臂
        0.5.3 pH敏感型连接臂
    0.6 主动靶向的聚合物前药纳米粒
        0.6.1 基于半乳糖配体的主动靶向聚合物前药设计
        0.6.2 基于叶酸配体的主动靶向聚合物前药设计
    0.7 藤黄酸的抗肿瘤作用机理及其临床应用
    0.8 课题的提出及研究内容
第1章 HPMA-D-Gal-GA靶向聚合物前药的合成及表征
    1.1 主要试剂及仪器
        1.1.1 主要试剂
        1.1.2 主要仪器
    1.2 合成部分
        1.2.1 藤黄酸单体A的合成
        1.2.2 藤黄酸单体B的合成
        1.2.3 D-半乳糖单体的合成
            1.2.3.1 D-半乳糖羟基的保护
            1.2.3.2 缩醛化D-半乳糖酯化反应
            1.2.3.2 D-半乳糖单体脱保护反应
        1.2.4 HPMA-D-Gal-GA聚合物的制备
    1.3 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的制备及其表征
        1.3.1 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的制备
        1.3.2 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的形态表征
        1.3.3 扫描电镜（SEM）观察表面聚合物形态
        1.3.4 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的粒径及zeta电位测定
        1.3.5 HPMA-D-Gal-GA聚合物表观分子量GPC测定
    1.4 紫外分光光度法测定HPMA-D-Gal-GA聚合物的聚合度
        1.4.1 对照品储备液和HPMA-D-Gal-GA靶向聚合物储备液的配置
        1.4.2 紫外最大吸收波长的选择
        1.4.3 藤黄酸标准曲线的绘制
        1.4.4 HPMA-D-Gal-GA聚合物的聚合度测定
    1.5 实验结果与讨论
        1.5.1 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的表征
            1.5.1.1 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的形态表征结果
            1.5.1.2 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的粒径及zeta电位测定结果
            1.5.1.3 HPMA-D-Gal-GA聚合物胶束的表观分子量测定结果
        1.5.2 HPMA-D-Gal-GA聚合物的聚合度测定结果
            1.5.2.1 HPMA-D-Gal-GA聚合物最大吸收波长的选择
            1.5.2.2 HPMA-D-Gal-GA聚合物的聚合度结果
    1.6 本章小结
第2章 HPMA-FA-GA靶向聚合物前药的合成及表征
    2.1 主要试剂及仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 合成部分
        2.2.1 藤黄酸单体C的合成
        2.2.2 叶酸单体的合成
        2.2.3 叶酸-藤黄酸衍生物单体的合成
        2.2.4 HPMA-FA-GA聚合物的制备
    2.3 HPMA-FA-GA聚合物胶束的制备及其表征
        2.3.1 HPMA-FA-GA聚合物胶束的制备
        2.3.2 HPMA-FA-GA聚合物胶束的形态表征
        2.3.3 扫描电镜（SEM）观察聚合物表面形态
        2.3.4 HPMA-FA-GA聚合物胶束的粒径及zeta电位测定
        2.3.5 HPMA-FA-GA聚合物表观分子量GPC测定
    2.4 紫外-可见分光光度法测定HPMA-FA-GA聚合物的聚合度
        2.4.1 对照品储备液和HPMA-FA-GA靶向聚合物储备液的配置
        2.4.2 紫外最大吸收波长的选择
        2.4.3 藤黄酸标准曲线的绘制
        2.4.4 HPMA-FA-GA聚合物的聚合度测定
    2.5 实验结果与讨论
        2.5.1 HPMA-FA-GA聚合物胶束的表征
            2.5.1.1 HPMA-FA-GA聚合物胶束的形态表征结果
            2.5.1.2 HPMA-FA-GA聚合物胶束的粒径及zeta电位测定结果
            2.5.1.3 HPMA-FA-GA聚合物胶束的表观分子量测定结果
        2.5.2 HPMA-FA-GA聚合物的聚合度测定
            2.5.2.1 HPMA-FA-GA聚合物最大吸收波长的选择
            2.5.2.2 HPMA-FA-GA聚合物的聚合度测定结果
    2.6 本章小结
第3章 藤黄酸HPMA聚合物前体药物的药代动力学研究及组织分布研究
    3.1 仪器和药品
        3.1.1 主要仪器
        3.1.2 主要药品
        3.1.3 实验动物
    3.2 藤黄酸HPMA聚合物前体药物的药动学研究
        3.2.1 分析方法建立
            3.2.1.1 紫外最大吸收波长确定
            3.2.1.2 样品处理
            3.2.1.3 标准曲线的建立
            3.2.1.5 精密度试验
            3.2.1.6 回收率试验
        3.2.2 .给药方案
        3.2.3 .血浆样品处理及测定
        3.2.4 试验结果
        3.2.5 讨论
    3.3 藤黄酸HPMA聚合物前体药物的组织分布研究
        3.3.1 组织分布方法学研究
            3.3.1.1 色谱条件
            3.3.1.2 样品处理
            3.3.1.3 标准曲线的建立
            3.3.1.4 专属性考察
            3.3.1.5 精密度试验
            3.3.1.6 回收率试验
        3.3.2 小鼠体内实验
            3.3.2.1 给药方案
            3.3.2.2 组织样品处理及测定
            3.3.2.3 小鼠体内分布结果及靶向性分析
    3.4 本章小结
第4章 藤黄酸HPMA聚合物前体药物的药效学研究
    4.1 主要材料和仪器
        4.1.1 主要试剂
        4.1.2 主要试剂
    4.2 体内药效实验
        4.2.1 细胞培养
        4.2.2 细胞增殖的MTT检测
        4.2.3 藤黄酸HPMA聚合物前体药物的细胞毒性测定结果与讨论
    4.3 体外药效实验
        4.3.1 S180肿瘤细胞株及来源
        4.3.2 试验动物
        4.3.3 试验方案
            4.3.3.1 动物模型的建立
            4.3.3.2 分组与给药
            4.3.3.3 统计学分析
        4.3.4 结果
            4.3.4.1 动物一般情况
            4.3.4.2 试验结果
        4.3.5 讨论
    4.4 本章小结
第5章 结论与展望
致谢
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]Gambogic acid induces mitochondria-dependent apoptosis by modulation of Bcl-2 and Bax in mantle cell lymphoma JeKo-1 cells[J]. Jingyan Xu,Min Zhou,Jian Ouyang,Jing Wang,Qiguo Zhang,Yong Xu,Yueyi Xu,Qian Zhang,Xihui Xu,Hui Zeng.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(02)



本文编号：3153538