抗西尼罗病毒抗体类药物的体外筛选
发布时间:2021-04-23 23:09
目的利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得抗西尼罗病毒抗体。方法首先,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测由噬菌体展示技术筛选获得的13株抗西尼罗病毒候选抗体与靶蛋白-西尼罗病毒E蛋白结构域Ⅲ(DⅢ)的结合;其次,将收集的含有西尼罗假病毒的细胞培养上清稀释102倍,分别与相应浓度的候选抗体室温孵育1 h后,将假病毒上清+抗体混合液感染BHK21或者K562细胞,48 h后,裂解细胞测荧光素酶活性(RLU)。结果 13株候选抗体均能识别并结合西尼罗病毒E蛋白DⅢ;其中2株抗体(抗体5和7)具有较好的中和活性,低浓度下(5 mg/L)即能有效阻断病毒入侵靶细胞;而2株抗体(抗体3和8)具有抗体增强效应(ADE),表现为靶细胞病毒感染增强。结论利用建立的西尼罗假病毒报告系统,体外筛选获得2株具有中和活性的抗西尼罗病毒抗体。
【文章来源】:国际药学研究杂志. 2020,47(07)北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测候选抗体与靶抗原WNV DⅢ的结合力
1.3 流式细胞仪检测CD32(FcγRⅡ)表达
1.4 抗体中和实验检测荧光素酶活性
1.5 统计学分析
2 结果
2.1 候选抗体与靶抗原WNV DⅢ的结合力
2.2 基于BHK21细胞的抗体中和实验
2.3 基于K562细胞的抗体中和实验
3 讨论
本文编号:3156219
【文章来源】:国际药学研究杂志. 2020,47(07)北大核心
【文章页数】:5 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.2 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测候选抗体与靶抗原WNV DⅢ的结合力
1.3 流式细胞仪检测CD32(FcγRⅡ)表达
1.4 抗体中和实验检测荧光素酶活性
1.5 统计学分析
2 结果
2.1 候选抗体与靶抗原WNV DⅢ的结合力
2.2 基于BHK21细胞的抗体中和实验
2.3 基于K562细胞的抗体中和实验
3 讨论
本文编号:3156219
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