舍曲林对金黄色葡萄球菌多重耐药逆转以及毒力抑制作用的研究

发布时间：2021-05-26 20:57

　　金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）是一种重要的食源性条件致病菌,严重时可导致致命感染。随着抗生素大量不合理使用,多重耐药金黄色葡萄球菌不断出现,对食品安全及人畜健康造成严重威胁。本研究以分离自养殖场以及临床上的多重耐药S.aureus为研究对象,研究S.aureus的抗生素耐药种类和耐药程度;利用PCR法研究S.aureus中β-内酰胺类、四环素类、林可酰胺、大环内酯类和氨基糖苷类抗生素的耐药基因以及多药外排泵基因norA的分布情况;并通过体外生长活力测定实验了解舍曲林及其联合抗生素使用对S.aureus体外抑菌及杀菌情况;分别采用结晶紫染色法和甲醇提取法研究舍曲林对S.aureus生物被膜和葡萄球菌黄素形成能力的影响;最后通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）研究舍曲林对S.aureus相关耐药基因和毒力基因转录水平的影响。利用统计学方法对实验结果进行相关性分析,结果如下:（1）分离自养殖场的5株S.aureus菌株至少对7种抗生素耐药,包括β-内酰胺类、四环素类、林可酰胺类、大环内酯类和氨基糖苷类抗生素。且最低抑菌浓度（MIC）均远超出... 

【文章来源】：华南理工大学广东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩写表
第一章 绪论
    1.1 金黄色葡萄球菌
        1.1.1 金黄色葡萄球菌的生物特性
        1.1.2 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
        1.1.3 金黄色葡萄球菌的流行性危害
        1.1.4 金黄色葡萄球菌生物被膜的形成
        1.1.5 金黄色葡萄球菌黄素
        1.1.6 金黄色葡萄球菌毒力因子表达调控系统
    1.2 抗生素
        1.2.1 抗生素耐药性
    1.3 非抗生素(non-antibiotics)
        1.3.1 非抗生素抑菌作用机制
        1.3.2 5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs):舍曲林
    1.4 治疗细菌耐药的策略
    1.5 本课题的研究意义及主要内容
第二章 金黄色葡萄球菌耐药性分析
    2.1 前言
    2.2 实验材料和仪器设备
        2.2.1 实验菌株
        2.2.2 实验仪器和设备
        2.2.3 实验试剂耗材
    2.3 实验方法
        2.3.1 细菌培养
        2.3.2 K-B纸片扩散法药敏试验
        2.3.3 最低抑菌浓度(MIC)测定
        2.3.4 DNA提取及引物合成
        2.3.5 PCR基因扩增
        2.3.6 PCR产物电泳验证
        2.3.7 数据分析
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 药敏纸片结果
        2.4.2 最低抑菌浓度(MIC)测定结果
        2.4.3 耐药基因检测结果
    2.5 本章小结
第三章 舍曲林对金黄色葡萄球菌耐药性的影响
    3.1 前言
    3.2 实验材料和仪器设备
        3.2.1 实验菌株
        3.2.2 实验仪器和设备
        3.2.3 实验试剂耗材
    3.3 实验方法
        3.3.1 棋盘法联合抑菌试验
        3.3.2 舍曲林对金黄色葡萄球菌生长活力的影响
        3.3.3 时间-杀菌曲线
        3.3.4 RNA提取及c DNA模板制备
        3.3.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
        3.3.6 数据分析
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 联合抑菌试验结果
        3.4.2 舍曲林对金黄色葡萄球菌活力的影响
        3.4.3 舍曲林与四环素联用时对金黄色葡萄球菌的杀菌作用
        3.4.4 舍曲林对norA和 mec A耐药基因表达的影响
    3.5 本章小结
第四章 舍曲林对金黄色葡萄球菌毒力因子的影响
    4.1 前言
    4.2 实验材料和仪器设备
        4.2.1 实验菌株
        4.2.2 实验仪器和设备
        4.2.3 实验试剂耗材
    4.3 实验方法
        4.3.1 金黄色葡萄球菌生物被膜测定
        4.3.2 葡萄球菌黄素测定
        4.3.3 β-半乳糖苷酶测定
        4.3.4 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
        4.3.5 数据分析
    4.4 实验结果
        4.4.1 生物被膜测定结果
        4.4.2 葡萄球菌黄素测定结果
        4.4.3 β-半乳糖苷酶测定结果
        4.4.4 舍曲林对毒力基因表达的影响
    4.5 结果讨论
    4.6 本章小结
结论与展望
    一、结论
    二、创新点
    三、展望
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的研究成果
致谢
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]苦参与抗生素配伍后对金黄色葡萄球菌抑菌效果的比较[J]. 蒋平,马慧娟,戴书杰,高雷,吴宝刚,张亚妮,左瑞华.  宜春学院学报. 2018(09)
[2]土木香提取物抑制金黄色葡萄球菌毒力因子分泌作用的研究[J]. 汤法银,刘桓妤,李文华,邓旭明,王建锋.  中国兽医杂志. 2018(02)
[3]新疆乌鲁木齐市生鲜乳中金黄色葡萄球菌污染状况及耐药性分析[J]. 吴星星,蔡扩军.  中国动物检疫. 2018(01)
[4]2016年中国CHINET细菌耐药性监测[J]. 胡付品,郭燕,朱德妹,汪复,蒋晓飞,徐英春,张小江,张朝霞,季萍,谢轶,康梅,王传清,王爱敏,徐元宏,沈继录,孙自镛,陈中举,倪语星,孙景勇,褚云卓,田素飞,胡志东,李金,俞云松,林洁,单斌,杜艳,郭素芳,魏莲花,邹凤梅,张泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,苏丹虹,汪瑞忠,房华,俞碧霞,赵勇,龚萍,郭大文,赵金英,刘文恩,李艳明,金炎,邵春红,温开镇,张贻荣,徐雪松,鄢超,喻华,黄湘宁,王山梅,楚亚菲,张利侠,马娟,周树平,周艳,朱镭,孟晋华.  中国感染与化疗杂志. 2017(05)
[5]全球抗生素耐药性现状分析及对策建议[J]. 王磊,曹巍.  军事医学. 2017(05)
[6]金黄色葡萄球菌双组份调节系统SaeRS对重要毒力基因的分子调控机制[J]. 许园园,丁宇,刘云灵,李丹,王良兴,余方友.  温州医科大学学报. 2015(09)
[7]黄酮类化合物对耐药金黄葡萄球菌mecA基因的影响[J]. 刘立新,高月林,张羽男,张楠楠.  黑龙江医药科学. 2015(01)
[8]黄芩提取物对金黄色葡萄球菌体内外抑菌作用的实验研究[J]. 张有志,李存保,杨丽敏,赵鹏伟,孙鹏,王美玲.  科学技术与工程. 2014(21)
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[10]金黄色葡萄球菌重要毒力因子的功能及其抑制剂研究进展[J]. 陈菲菲,狄红霞,蓝乐夫.  科学通报. 2013(36)

硕士论文
[1]金黄色葡萄球菌血浆凝固酶抗血清的制备及ELISA检测[D]. 李寅生.大连理工大学 2016
[2]食品中金黄色葡萄球菌的快速检测方法研究[D]. 张超楠.吉林大学 2012
[3]PCR技术检测肉及肉制品中金黄色葡萄球菌研究[D]. 刘景武.河北农业大学 2006



本文编号：3207055