基于CDK2和STAT3蛋白结构的抗癌小分子的筛

发布时间：2021-06-07 01:36

　　研究背景:随着分子生物学和结构生物学的发展,作为受体的生物大分子的三维结构被越来越多的发现和测定。根据已知生物大分子的结构信息,利用计算化学和计算生物学方法筛选与其相互作用的小分子,即基于结构的药物设计方法（structure-based durg design,SBDD）。这个方法能够大大降低新药研发的成本和周期,因此越来越多的应用在目前的药物研发领域。肿瘤作为一种严重威胁人类健康的疾病,一直是科学家们致力于攻克的目标。细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin dependent kinase,CDK）,是丝/苏氨酸蛋白激酶家族中的一员,是参与细胞周期调控的关键酶。CDK2作为其中一个亚型,其与cyclinE和cyclin A结合后,能够促进细胞G1到S期的转变,同时参与调控S期进程。有研究发现,超过80%的癌症都会出现CDK2过表达,如肝癌,乳腺癌等,因此发现靶向作用于CDK2的抑制剂有利于发现新型抗癌药物;信号转导与转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）参与JAK-STAT3信号通路的作用,J... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一部 CDK2 ATP竞争性小分子抑制剂的筛选、改造和活性检测
    材料和方法
        1. 材料
            1.1 菌种、载体和细胞系
            1.2 仪器和试剂
            1.3 主要反应缓冲液
        2. 方法
            2.1 虚拟筛选
            2.2 CDK2-cyclinA2复合物表达纯化
            2.3 体外酶活检测体系建立
            2.4 竞争性实验验证
            2.5 HepG2细胞培养和CCK8实验
    结果
        1. 分子对接结果
        2. CDK2-cyclinA2复合物纯化结果
        3. 小分子体外酶活检测结果
        4. ATP竞争性实验结果
        5. 细胞增殖抑制实验
    讨论
    结论
第二部 STAT3小分子抑制剂的筛选和活性检测
    材料和方法
        1. 材料
        2. 方法
            2.1 虚拟筛选
            2.2 STAT3蛋白表达纯化
            2.3 STAT3突变体构建
            2.4 荧光偏振实验
            2.5 CCK-8 实验
            2.6 Biacore实验
    结果
        1.分子对接结果
        2.STAT3纯化结果
        3.FP实验结果
        4.小分子对癌细胞的增殖抑制
        5.B9在STAT3蛋白上的作用位点是SH2结构域
    讨论
    结论
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]荧光偏振技术在生命科学中的研究进展[J]. 赵晨,张亮,倪原.  现代生物医学进展. 2010(16)
[2]STAT3信号转导通路及肿瘤治疗的方法[J]. 李庆伟,褚丹,王继红.  沈阳师范大学学报(自然科学版). 2009(02)



本文编号：3215575