莫诺苷对脑缺血后神经发生的影响及莫诺苷载药微球制备和缓释性能研究

发布时间：2017-04-23 15:11

  本文关键词：莫诺苷对脑缺血后神经发生的影响及莫诺苷载药微球制备和缓释性能研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：脑血管病是世界上危害人类健康和生命的主要疾病之一,其中一半以上是缺血性脑血管病,至今尚未有十分有效地治疗措施和药物。Wnt (Wingless/integrase-1)信号途径是一条多环节、多作用位点的开放通路,信号转导调节作用明显,在人和动物的生长和发育过程中可调控细胞增殖、分化,特别在大脑的可塑性中至关重要。莫诺苷是从中药山茱萸中分离提取的一种环烯醚萜苷类单体,具有抗氧化、抗凋亡作用,可以保护SH-SY5Y神经细胞由过氧化氢造成的损伤,减小由大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)造成的脑梗死体积,诱导血管新生等。但是莫诺苷直接给药存在药物作用时间短、药物利用率低等问题,本文在研究莫诺苷直接给药对局灶性脑缺血损伤再灌注大鼠神经发生的影响之外,还以可生物降解的聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)为载体,制备了莫诺苷／聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)载药微球,希望通过莫诺苷载药微球的缓释控释提高药物利用度,延长药效。本文主要工作如下：(1)以莫诺苷为治疗药物,采用MCAO模型右侧局灶性脑缺血0.5 h再灌注,并通过免疫荧光和蛋白免疫印迹方法,研究了莫诺苷对大鼠大脑皮层中Wnt信号通路相关因子表达变化的影响,以及对神经细胞增殖、分化的影响。实验发现：莫诺苷不仅可以提高大鼠脑室下区(SVZ) BrdU/Map2和BrdU/NCAM阳性细胞数量,增加Wnt7a、Fzd等因子在大脑皮层的表达水平,而且莫诺苷还可以通过激活Wnt信号通路来促进神经发生,对治疗脑缺血病以及药物干预治疗缺血性脑疾病有着深远的意义。(2)以莫诺苷为药物、聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)为载体材料,通过乳化法制备了莫诺苷／聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)载药微球。用激光散射粒度分析仪对微球粒径及其分布进行了表征。考察了单体浓度、药物用量、反应时间对微球粒径、载药率、包封率的影响,并对载药微球在缓冲液中的药物释放性能进行了研究,同时考察了其在大鼠体内控制释放的效果。结果表明,莫诺苷／聚(α-氰基丙烯酸异丁酯)载药微球可提高莫诺苷的药物利用率,延长莫诺苷在体内有效血药浓度的维持时间,从直接给药的6小时达到缓释后的24小时,对治疗疾病效果有很大的提高。
【关键词】：莫诺苷 缺血性脑卒中 神经发生 Wnt通路 药物缓释
【学位授予单位】：北京化工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R943
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-15
• 第一章 绪论15-29
• 1.1 引言15
• 1.2 莫诺苷及其药理作用15-16
• 1.3 神经营养因子对局灶性脑缺血后神经再生的影响16-19
• 1.3.1 成年大脑中神经发生的功能意义16
• 1.3.2 局灶性脑缺血后的神经发生16-17
• 1.3.3 缺血诱导的神经发生的机制17-19
• 1.4 Wnt信号通路对神经再生的影响19-22
• 1.4.1 Wnt7a20
• 1.4.2 卷曲蛋白(Frizzled)20-21
• 1.4.3 结肠腺瘤性息肉病蛋白(APC)21
• 1.4.4 散乱蛋白(Dishevelled,Dsh/DVL)21-22
• 1.4.5 聚唾液酸神经细胞黏附分子PSA-NCAM22
• 1.5 神经因子对神经发生的影响22-25
• 1.5.1 神经元素Ngn223
• 1.5.2 Pax623-24
• 1.5.3 TRB24
• 1.5.4 MESI24-25
• 1.6 药物微球缓释控释简介25-27
• 1.6.1 药物缓释系统25
• 1.6.2 缓释控释响应体系25-26
• 1.6.3 聚(α-氰基丙烯酸酯)微球简介26-27
• 1.6.4 聚(α-氰基丙烯酸酯类)微球应用27
• 1.7 本文的目的意义27
• 1.8 本文主要研究内容27-29
• 第二章 莫诺苷对神经发生的影响及机理29-55
• 2.1 实验材料29-32
• 2.1.1 药物与试剂29-31
• 2.1.2 实验动物31
• 2.1.3 设备与仪器31-32
• 2.2 实验方法32-38
• 2.2.1 大脑中动脉闭塞(MCAO)致局灶性脑缺血大鼠模型的制备32
• 2.2.2 分组及给药32-33
• 2.2.3 神经功能评分33
• 2.2.4 用于免疫荧光的组织取材方法33-34
• 2.2.5 用于Western Blot的组织取材方法34-35
• 2.2.6 免疫组织荧光染色35
• 2.2.7 免疫组织荧光双标染色(BrdU/CAM、BrdU/Map2)35-36
• 2.2.8 免疫荧光图像分析方法36
• 2.2.9 Western Blot检测Wnt7a、DVL、Fzd、Apc的表达36-38
• 2.2.10 数据处理与统计学分析38
• 2.3 结果与讨论38-55
• 2.3.1 莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠BrdU标记的细胞增殖的影响38-41
• 2.3.2 莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠SVZ区NCAM表达的影响41-43
• 2.3.3 莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠SVZ区Map2表达的影响43-45
• 2.3.4 莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠SVZ区BrdU~+/Map2~+和BrdU~+/NCAM~+表达的影响45-49
• 2.3.5 莫诺苷对局灶性脑缺血大鼠皮层Wnt7a表达的影响49-50
• 2.3.6 莫诺苷对局灶性脑缺血大鼠皮层Fzd表达的影响50-52
• 2.3.7 莫诺苷对局灶性脑缺血大鼠皮层DVL表达的影响52-53
• 2.3.8 莫诺苷对局灶性脑缺血大鼠皮层APC表达的影响53-55
• 第三章 莫诺苷缓释微球的制备及缓释研究55-73
• 3.1 实验材料55-56
• 3.1.1 药物与试剂55-56
• 3.1.2 实验动物56
• 3.1.3 设备与仪器56
• 3.2 实验方法56-59
• 3.2.1 莫诺苷缓释纳米微球的制备56
• 3.2.2 莫诺苷标准曲线的建立56-57
• 3.2.3 莫诺苷微球包封率和载药率的测定57
• 3.2.4 莫诺苷微球的药物体外缓释性考察57-58
• 3.2.5 稳定性测试58
• 3.2.6 莫诺苷微球的药物大鼠体内缓释性考察58-59
• 3.3 结果与讨论59-73
• 3.3.1 莫诺苷标准曲线的建立59-60
• 3.3.2 莫诺苷载药微球的制备条件优化60-62
• 3.3.3 正交实验优化实验方案62-65
• 3.3.4 莫诺苷微球的药物体外缓释性考察65-67
• 3.3.5 莫诺苷微球的稳定性测试67-68
• 3.3.6 莫诺苷缓释微球大鼠体内缓释性考察68-73
• 第四章 结论73-74
• 参考文献74-82
• 致谢82-83
• 研究成果及发表的学术论文83-84
• 作者和导师简介84-87
• 学位论文答辩委员会决议书87-88

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 熊山;李敬来;吕圭源;张振清;;莫诺苷的大鼠组织分布[J];军事医学;2013年10期

2 ;Morroniside protects cultured human umbilical vein endothelial cells from damage by high ambient glucose[J];Acta Pharmacologica Sinica;2004年04期

3 薛金龙;孙芳玲;刘婷婷;侯虹丽;魏仁平;向本旭;艾厚喜;王玉兰;张丽;石淑先;王文;;莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响[J];中国比较医学杂志;2014年09期

  本文关键词：莫诺苷对脑缺血后神经发生的影响及莫诺苷载药微球制备和缓释性能研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：322592