顺铂联合小檗碱通过诱导DNA损伤和ROS依赖性凋亡抑制肺癌细胞A549的生长

发布时间：2021-07-10 14:13

　　目的探究顺铂联合小檗碱（berberine,BBR）对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的作用及抗肺癌机制。方法 MTT法分别检测不同浓度的BBR、BBR联合不同浓度的顺铂对A549细胞增殖的作用;设置溶剂组、顺铂组、小檗碱组和顺铂+小檗碱组,细胞集落实验检测细胞集落形成;流式细胞术实验检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、cleaved-caspase-3及γH2AX蛋白表达;免疫荧光实验检测DNA损伤;活性氧（reactive oxygen species, ROS）清除剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine, NAC）预处理后,流式细胞术实验和Western blot分别检测ROS水平和Bcl-2、cleaved-caspase-3蛋白表达。结果 BBR及BBR联合顺铂浓度依赖性抑制A549细胞生长（P<0.05）;相对对照组和单药组,联合组抑制细胞集落形成,促进细胞凋亡,抑制Bcl-2和提高cleaved-caspase-3表达,诱导DNA损伤及提高ROS水平（P<0.05）。联用NAC后,凋亡率降低,Bcl-2和cleaved-cas... 

【文章来源】：中国药理学通报. 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1细胞株
        1.1.2药物与试剂
        1.1.3仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 MTT检测A549细胞活力情况
        1.2.3 细胞集落实验检测A549集落形成情况
        1.2.4 流式细胞仪检测A549细胞凋亡情况
        1.2.5 免疫荧光检测A549细胞DNA损伤情况
        1.2.6 流式细胞仪检测A549细胞内ROS情况
        1.2.7 Western blot法检测A549细胞内相关蛋白表达
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 顺铂联合BBR增强抑制A549细胞增殖
    2.2 顺铂联合BBR增强抑制A549细胞集落形成
    2.3 顺铂联合BBR增强诱导A549细胞凋亡
    2.4 顺铂联合BBR增强诱导A549细胞的DNA损伤
    2.5 顺铂联合BBR增强A549细胞内ROS水平
    2.6 顺铂联合BBR升高ROS促进A549细胞凋亡
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]积雪草酸对人舌癌TCA-8113细胞增殖、凋亡的影响[J]. 董易,褚冬青,马春宇,黄建华,王一.  中国药理学通报. 2019(11)



本文编号：3276067