一种海洋真菌的次级代谢产物抗甲型流感病毒的机制研究
发布时间：2021-07-17 17:38
研究背景:流行性病毒感冒是严重危害人类健康的传染性疾病。根据流感病毒核蛋白和基质蛋白抗原性的不同,可以将流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）、丁（D）四种亚型,其中甲型流感病毒最容易发生变异。甲型流感病毒新亚型的出现或旧亚型的重现往往会导致流感大流行。例如,1918年西班牙爆发的甲型流感病毒H1N1病毒造成全世界约5亿人感染,约有5千万到1亿人死亡。甚至在100年后的今天,流感病毒仍然在这个星球上肆虐。据世界卫生组织（WHO）最新报道,在全球范围内,流感流行每年造成约300万至500万严重病例,约29万至65万例与呼吸道疾病相关的死亡。显然,这已造成了严重的社会和经济问题。流感的防治,尤其是药物治疗,已是迫在眉睫。迄今为止,临床应用的抗流感药物主要有神经氨酸酶抑制剂和M2离子通道抑制剂,但抗流感病毒治疗耐药性病例增多、药物毒副作用等问题一直困扰着现有化学药物的发展和应用[1]。因此,人们迫切地希望寻找结构新颖、生物活性独特、毒性低的新型抗流感病毒药物。由于陆地资源的过度开采,人们对海洋资源的开发也越来越重视。海洋是一个开放且复杂的生态系统,蕴藏着极其丰富的天然产物,海洋生物圈是潜在...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－２?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ以剂量依赖性方式减少ＭＤＣＫ细胞中Ａ?／?Ｐｕｅｒｔｏ?Ｒｉｃｏ?／?８／３４??
利用间接免疫荧光实验、实时荧光定量ＰＣＲ以及Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ的方法检测病毒??核酸以及病毒蛋白在细胞中的表达情况。间接免疫荧光实验显示??ＳｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎＸ能明显的抑制流感病毒ＮＰ蛋白的表达（图２－３Ａ）。实时??荧光定量ＰＣＲ实验结果发现，Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ能浓度依赖性的抑制病毒??ＨＡｍＲＮＡ的转录，与病毒对照组相比具有统计学差异（Ｐ＜０．０１）（图２－３Ｂ）。??同时ＮＰ蛋白（图２－３?Ｃ）的表达也明显受到了抑制，这些结果都说明??Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ能抑制甲型流感病毒ＰＲ８株在宿主细胞中的复制。??２９??
既然Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ并不影响流感病毒包膜蛋白血凝素ＨＡ的活性，??那么它是否影响着流感病毒的另一重要包膜蛋白神经氨酸酶ＮＡ呢？对此，我??们通过神经氨酸酶抑制实验进行了检测。实验结果如图３－２所示，??Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ对祌经Ｍ酸酶Ｈ有极其微弱的抑制活性，阳性药物帕拉米??韦相比，表明Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ儿乎不影响ＮＡ的活性。由此，我们推断??Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ?作用于子代病毒的释放过程。??：１２?．?Ｐｃ?ｒａｍｉ＇ｉｒ??Ｓ?■?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ??？Ｕ?／—？??＼，?ｆ??＼?－／??彐???－〇?０?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ??１?ｉ〇－６?ｈ？－ｌｏ－．ｏ－Ｍｏ－Ｈｏ＇?ｉｒ?１０＾??—Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｌ?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ?（ｊｉＭ）??图３－２?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ和帕拉米韦对ＮＡ活性的影响。??Ｆｉｇｕｒｅ?３－２?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ?ｏｒ?ｐｅｒａｍｉｖｉｒ?ｏｎ?ＮＡ?ａｃｔｉｖｉｔｙ．??３．?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ作用于病毒复制的早期??随后，我们通过不同药物作川模式检测来探究Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ的作川??Ｐ介段。结果显示Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ在治疗模式下司以较好的发扑：抗流感病办??作用（３－３?Ａ）。随后
【参考文献】：
期刊论文
[1]美国FDA批准Xofluza（baloxavir marboxil）治疗急性单纯性流感[J]. 夏训明. 广东药科大学学报. 2018(05)
[2]强生公司研制的治疗流感药物中期试验获得成功[J]. 李培,林东昉. 中国感染与化疗杂志. 2018(01)
[3]深海极端环境与生命过程研究现状与对策[J]. 李超伦,李富超. 中国科学院院刊. 2016(12)
[4]海洋来源的聚酮类化合物及其活性研究进展[J]. 张柳红,宋双. 中山大学研究生学刊（自然科学.医学版）. 2015(04)
[5]抗病毒药物——法匹拉韦[J]. 赵旭,周辛波,钟武,李行舟. 临床药物治疗杂志. 2015(04)
[6]深海微生物多样性[J]. 王风平,周悦恒,张新旭,肖湘. 生物多样性. 2013(04)
[7]海洋真菌活性代谢产物的研究进展[J]. 王劲松,易庆平,向会耀. 食品科学. 2011(S1)
[8]禽流感及其对经济社会影响的研究综述[J]. 李鹏,刘影. 江西师范大学学报(自然科学版). 2009(02)
[9]深海极端环境深部生物圈微生物学研究综述[J]. 党宏月,李铁刚,曾志刚,秦蕴珊. 海洋科学集刊. 2006(00)
[10]现代检验诊断新技术(五十) 禽流感的检验诊断[J]. 王金良. 开卷有益(求医问药). 2006(02)
博士论文
[1]深海热液口微生物—病毒互作及其次生代谢产物抗肿瘤转移活性的研究[D]. 何天良.浙江大学 2015
硕士论文
[1]杨梅素及二氢杨梅素抗甲型流感病毒作用初制的研究[D]. 刘淼淼.南方医科大学 2018
[2]1,3-二羟基-6-苯并[c]色烯酮靶向甲型流感病毒PB2的作用研究[D]. 刘腾.南方医科大学 2018
[3]神经氨酸酶新型抑制剂的分子动力学研究[D]. 李明会.哈尔滨理工大学 2016
[4]甲型H1N1流感病毒引起机体免疫反应的分析[D]. 王海.浙江大学 2011
[5]两株深海来源真菌活性次级代谢产物的研究[D]. 周丽娜.中国海洋大学 2010
本文编号：3288634
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：89 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－２?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ以剂量依赖性方式减少ＭＤＣＫ细胞中Ａ?／?Ｐｕｅｒｔｏ?Ｒｉｃｏ?／?８／３４??
利用间接免疫荧光实验、实时荧光定量ＰＣＲ以及Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ的方法检测病毒??核酸以及病毒蛋白在细胞中的表达情况。间接免疫荧光实验显示??ＳｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎＸ能明显的抑制流感病毒ＮＰ蛋白的表达（图２－３Ａ）。实时??荧光定量ＰＣＲ实验结果发现，Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ能浓度依赖性的抑制病毒??ＨＡｍＲＮＡ的转录，与病毒对照组相比具有统计学差异（Ｐ＜０．０１）（图２－３Ｂ）。??同时ＮＰ蛋白（图２－３?Ｃ）的表达也明显受到了抑制，这些结果都说明??Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ能抑制甲型流感病毒ＰＲ８株在宿主细胞中的复制。??２９??
既然Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ并不影响流感病毒包膜蛋白血凝素ＨＡ的活性，??那么它是否影响着流感病毒的另一重要包膜蛋白神经氨酸酶ＮＡ呢？对此，我??们通过神经氨酸酶抑制实验进行了检测。实验结果如图３－２所示，??Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ对祌经Ｍ酸酶Ｈ有极其微弱的抑制活性，阳性药物帕拉米??韦相比，表明Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ儿乎不影响ＮＡ的活性。由此，我们推断??Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ?作用于子代病毒的释放过程。??：１２?．?Ｐｃ?ｒａｍｉ＇ｉｒ??Ｓ?■?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ??？Ｕ?／—？??＼，?ｆ??＼?－／??彐???－〇?０?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ?ｉ??１?ｉ〇－６?ｈ？－ｌｏ－．ｏ－Ｍｏ－Ｈｏ＇?ｉｒ?１０＾??—Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ｏｌ?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ?（ｊｉＭ）??图３－２?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ和帕拉米韦对ＮＡ活性的影响。??Ｆｉｇｕｒｅ?３－２?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ?ｏｒ?ｐｅｒａｍｉｖｉｒ?ｏｎ?ＮＡ?ａｃｔｉｖｉｔｙ．??３．?Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ作用于病毒复制的早期??随后，我们通过不同药物作川模式检测来探究Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ的作川??Ｐ介段。结果显示Ｓｐｉｒｏｓｔａｐｈｙｌｏｔｒｉｃｈｉｎ?Ｘ在治疗模式下司以较好的发扑：抗流感病办??作用（３－３?Ａ）。随后
【参考文献】：
期刊论文
[1]美国FDA批准Xofluza（baloxavir marboxil）治疗急性单纯性流感[J]. 夏训明. 广东药科大学学报. 2018(05)
[2]强生公司研制的治疗流感药物中期试验获得成功[J]. 李培,林东昉. 中国感染与化疗杂志. 2018(01)
[3]深海极端环境与生命过程研究现状与对策[J]. 李超伦,李富超. 中国科学院院刊. 2016(12)
[4]海洋来源的聚酮类化合物及其活性研究进展[J]. 张柳红,宋双. 中山大学研究生学刊（自然科学.医学版）. 2015(04)
[5]抗病毒药物——法匹拉韦[J]. 赵旭,周辛波,钟武,李行舟. 临床药物治疗杂志. 2015(04)
[6]深海微生物多样性[J]. 王风平,周悦恒,张新旭,肖湘. 生物多样性. 2013(04)
[7]海洋真菌活性代谢产物的研究进展[J]. 王劲松,易庆平,向会耀. 食品科学. 2011(S1)
[8]禽流感及其对经济社会影响的研究综述[J]. 李鹏,刘影. 江西师范大学学报(自然科学版). 2009(02)
[9]深海极端环境深部生物圈微生物学研究综述[J]. 党宏月,李铁刚,曾志刚,秦蕴珊. 海洋科学集刊. 2006(00)
[10]现代检验诊断新技术(五十) 禽流感的检验诊断[J]. 王金良. 开卷有益(求医问药). 2006(02)
博士论文
[1]深海热液口微生物—病毒互作及其次生代谢产物抗肿瘤转移活性的研究[D]. 何天良.浙江大学 2015
硕士论文
[1]杨梅素及二氢杨梅素抗甲型流感病毒作用初制的研究[D]. 刘淼淼.南方医科大学 2018
[2]1,3-二羟基-6-苯并[c]色烯酮靶向甲型流感病毒PB2的作用研究[D]. 刘腾.南方医科大学 2018
[3]神经氨酸酶新型抑制剂的分子动力学研究[D]. 李明会.哈尔滨理工大学 2016
[4]甲型H1N1流感病毒引起机体免疫反应的分析[D]. 王海.浙江大学 2011
[5]两株深海来源真菌活性次级代谢产物的研究[D]. 周丽娜.中国海洋大学 2010
本文编号：3288634
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