硝苯地平通过调控COX-2拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤

发布时间：2021-08-01 02:34

　　目的研究硝苯地平（Nif）对心脏微血管内皮细胞（CMECs）缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）损伤的作用与机制。方法通过建立心脏微血管内皮细胞H/R模型;在H/R模型基础上,分别用不同浓度的硝苯地平（Nif）处理内皮细胞,采用比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的漏出情况;采用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞的早期凋亡;TUNEL法观察细胞晚期凋亡水平;酶联免疫吸附法（ELISA）测定白介素1β（IL-1β）的含量、内皮细胞黏附分子（ICAM-1）的含量和COX-2产物（PGE₂）的含量;Western blot检测COX-2蛋白的表达;结果与Control组相比,COX-2蛋白表达上调、乳酸脱氢酶LDH的漏出增加,产物PGE₂的量上升。Nif(10.0、1.0、0.1μmol·L^-1)3个剂量组可呈现量效依赖性地降低炎症因子IL-1β的含量,减轻凋亡,降低H/R损伤COX-2蛋白的高表达、减少产物PGE₂的产生。结论 Nif能保护CM... 

【文章来源】：中国药理学通报. 2020,36(07)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料、试剂及主要仪器
    1.2 CMECs的分离与培养
    1.3 内皮细胞H/R模型的建立及实验分组
    1.4 ELISA试剂盒、LDH试剂盒分别检测细胞上清液中IL-1β、PGE2的蛋白水平以及乳酸脱氢酶(LDH)的漏出水平
    1.5 Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞早期凋亡
    1.6 TUNEL检测细胞晚期凋亡
    1.7 Western blot检测细胞蛋白的表达
    1.8 统计学处理
2 结果
    2.1 CMECs H/R模型时间点的确立
        2.1.1 CMECs H/R后COX-2蛋白表达变化
        2.1.2 CMECs在H/R状态下LDH的时效关系
    2.2 Nif对H/R IL-1β、ICAM-1表达的影响
        2.2.1 Nif对H/R后炎症因子IL-1β的表达情况
        2.2.2 Nif对H/R后黏附分子ICAM-1的表达情况
    2.3 Nif对CMECs H/R后细胞凋亡的影响
        2.3.1 Annexin V FITC/PI法检测早期凋亡
        2.3.2 TUNEL法检测晚期凋亡
    2.4 Nif对H/R后COX-2蛋白表达的影响
    2.5 Nif对H/R后产物PGE2的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]硝苯地平和地尔硫?调控环氧合酶-2的表达和活性拮抗L型钙通道敲除H9c2细胞缺氧/复氧损伤[J]. 柳满,陈润济,蔡文锋,汪彬,石刚刚,郑付春.  汕头大学医学院学报. 2019(02)
[2]钙拮抗剂调节钙非依赖磷脂酶A2拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的研究[J]. 周巧玲,王远航,林泓,汪彬,石刚刚,郑付春.  中国药理学通报. 2017(08)
[3]碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心脏微血管内皮细胞缺氧复氧损伤保护机制的研究[J]. 周燕琼,张艳美,高分飞,黄展勤,陈一村,郑燕珊,石刚刚.  中国药理学通报. 2014(02)
[4]新生大鼠心脏微血管内皮细胞的分离培养及鉴定[J]. 周燕琼,郭福晓,贾强用,张艳美,郑燕珊,李乐娜,石刚刚.  汕头大学医学院学报. 2008(03)
[5]环氧合酶与动脉粥样硬化[J]. 李洪涛.  心血管病学进展. 2004(01)
[6]硝苯地平对缺血再灌注心肌保护作用的病理学研究[J]. 林朝胜,王世贤,孙文利,董宝印.  临床与实验病理学杂志. 1996(02)



本文编号：3314665