UPLC-MS/MS测定斯皮诺素在Caco-2细胞的转运特征

发布时间：2021-08-02 11:08

　　目的:建立一种测定Caco-2细胞中斯皮诺素的超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法,研究斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运方式。方法:采用BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,流动相为水—甲醇溶液,梯度洗脱,流速0.30 mL·min^-1;质谱测定采用电喷雾离子源,负离子模式,多反应监测（MRM）定量离子对m/z 607→427,以Caco-2细胞模型研究斯皮诺素的双向转运,考察斯皮诺素浓度及P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）抑制剂对斯皮诺素转运的影响。运用UPLC-MS/MS检测药物浓度,计算其表观渗透系数。结果:UPLC-MS/MS检测斯皮诺素具有良好的线性（r²>0.999 0）、精密度的RSD≤15%,准确度在88%¹15%之间,绝对回收率均在80%以上,斯皮诺素最低检测限为2 ng·mL^-1。斯皮诺素在Caco-2细胞中,其转运方向主要是从绒毛面（AP）→基底面（BL）,且与浓度相关。斯皮诺素质量浓度... 

【文章来源】：药物分析杂志. 2016,36(06)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 仪器和试药
2 方法
    2.1 色谱和质谱条件
        2.1.1 色谱条件
        2.1.2 质谱条件
    2.2 细胞培养条件及方法
    2.3 测定单层细胞的跨膜电阻值
    2.4 样品处理
    2.5 数据处理方法及数据分析
    2.6 方法学研究
        2.6.1 分析方法的选择
        2.6.2 专属性
        2.6.3 线性关系考察和检测限测定
        2.6.4 精密度、准确度、回收率和稳定性测定
        2.6.5 基质效应
    2.7 斯皮诺素在Caco-2细胞中的转运
        2.7.1 转运前后细胞单层膜电阻值的变化
        2.7.2 不同浓度斯皮诺素的表观渗透系数及外排率
        2.7.3 80μg·m L-1斯皮诺素单用及与100μg·m L-1维拉帕米联用时的表观渗透系数及外排率
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]斯皮诺素在体胃肠吸收动力学研究[J]. 张婷,解军波,刘子艳,张彦青,陈大为.  中国实验方剂学杂志. 2012(13)
[2]中药化学成分肠吸收研究中Caco-2细胞模型和标准操作规程的建立[J]. 杨秀伟,杨晓达,王莹,马莲,张悦,杨晓改,王夔.  中西医结合学报. 2007(06)
[3]酸枣仁不同炮制品及炒酸枣仁中总黄酮与总皂苷的镇静催眠作用比较[J]. 吴玉兰,许惠琴,陈诜.  时珍国医国药. 2005(09)
[4]Caco-2细胞模型——药物吸收研究的有效“工具”[J]. 关溯,陈孝,黄民.  中国药理学通报. 2004(06)



本文编号：3317456