糖皮质激素对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞表面TLR4/CD14/MD-2 受体复合物的影响

发布时间：2021-08-16 10:58

　　正文：目的观察地塞米松对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞表面TLR4/CD14/MD-2受体复合物及其介导信号转导通路的影响,从受体识别水平探讨糖皮质激素对固有免疫中巨噬细胞识别病原微生物环节的影响。方法剂量为10、50、100、150、200ng/μl地塞米松和（或）1 μg/ml脂多糖作用RAW264.7细胞1、4、8、14、18、24h,应用RT-PCR技术检测细胞表面TLR4、CD14和MD-2mRNA水平的变化,western blot技术检测NF-κB蛋白表达,ELISA检测细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-1、IL-6和趋化因子IL-8、MIP-1含量的变化。采用SPSS 21.0统计软件进行统计分析。结果①1μg/ml LPS刺激RAW264.7细胞24h内,细胞表面TLR4、CD14和MD-2 mRNA明显上调：②不同剂量地塞米松（10、50、100、150、 200ng/μl）作用24h后,TLR4、CD14和MD-2 mRNA水平随DEX剂量增加而下降,呈浓度依赖性,并且CD14和MD-2 mRNA下调程度大于TLR4 mRNA下调程度;③预先应用10... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１?地塞米松对小鼠巨幢细胞ＲＡＷ２６４．７生长增殖的影响??

ｍＲＮＡ于４ｈ升至最高后逐渐下降，１４ｈ降至最低，２４ｈ稍有回升。各时间点ＴＬＲ４、??ＣＤ１４、ＭＤ－２ｍＲＮＡ均島于空白对照姐。ＬＰＳ上调ＴＬ民４、ＣＤ１４和ＭＤ－２ｍＲＮＡ??转录水平，差异具有统计学意义（Ｐ＜〇．〇５）。（见表４，图２）??表?４ＬＰＳ?对?ＴＬＲ４、ＣＤ１４?和?ＭＤ－２ｍＲＮＡ?表运的影响（ｘ±ｓ，ｎ＝４，?ＪＡＡＵ）??组别?ＴＬＲ４?ＣＤ１４?ＭＤ－２??空白对照组?１．００＋Ａ?１．００＋Ａ?１．００＋＆??ＬＰＳ－化?２．０２±０．１１’?２．６０?＋?０．１１＊＂＇?３．０９＋０．１５＊＾??ＬＰＳ－４ｈ?１．７１?±０．１５?心?２．８１＋０．１３?心?３．３８±０．１２‘＋。??ＬＰＳ－８ｈ?１．６７±０．０７心?２．１６±０．０４＊?心?２．５３±０．１０‘＋＆??ＬＰＳ－１４ｈ?１．５３?±０．０８?心?２．０３?±０．０６＇＋?１．４８?＋?０．０３＇心??ＬＰＳ－１?化?１．６１±０．０５’＋么?１．８４±０．０３‘＋?１．６８±０．０７＇＋＾??Ｉ?ＬＰＳ－２４ｈ?１．８８?＋?０．０２＊?１．９２±０胞’＋?１．８９＋０．０６＇＋

ＤＥＸ下调ＴＬＲ４、ＣＤ１４和ＭＤＪｍＲＮＡ转录水平，差异具有统计学意义??（Ｐ＜０．０５）。并且随ＤＥＸ剂量增加，ＣＤ１４和ＭＤ－２?ｍＲＮＡ下调幅度（约３７－４１％）??比ＴＬＲ４ｍＲＮＡ下调幅度（约１７％）更大，程度更深。（见表５，图３）??表５?不同剂呈ＤＥＸ对ＴＬＲ４、ＣＤ１４和ＭＤ－２?ｍＲＮＡ表达的影巧（Ｘ?＋Ｓ，?ｎ＝４，?－２么么口）??组别?ＴＬＲ４?ＣＤ１４?ＭＤ－２??空白对照组?１．００＋?１．００＋?１．００’Ａ??ＤＥＸ?１０?ｎｇ／ｆｉｌ?０．９６?＋?０．０７＇＾?０．９４?＋?０．０５＊＾＾?０．９１?±０．１５一??ＤＥＸ５０?ｎｇ／ｆｉｌ?０．９２?＋?０．０４＊＾?０．８５±０．０７＊＋么?０．８４?＋?０．１１＾??ＤＥＸ?１００?ｎｇ／ｊｉｌ?０．９０?＋?０．０５＊?０．７７＋０．０１＊＇＾?０．７２＋０．１１＊??ＤＥＸ１５０ｎｇ／ｐｌ?０．８７?±０．０２＊?０．７２±０．０５‘。?０．６７＋０．０６＊??ＤＥＸ２００?ｎｇ／ｆｉｌ?０．８３＋０．０１＊?０．６３±０．０３心?０．５化０．０２＊??注！?？：?ｐ＜０．０５ｖｓ?巧白对照；＋；?Ｐ＜〇．〇５ｖｓＤ巧?ｌＯＯｎｇ／冲?Ａ：Ｐ＜０．０５ｖｓＤＥＸ２１）０

【参考文献】：
期刊论文
[1]Inflammatory response of macrophages in infection[J]. Ling Zhang,Cheng-Cai Wang.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2014(02)
[2]苯并咪唑衍生物BM935抑制T细胞增殖的机制研究[J]. 刘进,余小平,舒茂,罗兴燕,郭波,刘阳,林治华,邹强.  中国药理学通报. 2013(03)
[3]糖皮质激素对固有免疫细胞作用机制的研究进展[J]. 谢冠群,季巾君,徐莉,范永升.  浙江中医药大学学报. 2013(02)
[4]侵袭性真菌感染的研究进展[J]. 彭雪松,刘岚.  国际检验医学杂志. 2010(09)
[5]人偏肺病毒感染小鼠肺内Toll样受体表达及PolyI:C对病毒感染的影响[J]. 窦颖,赵耀,张志勇,赵晓东.  病毒学报. 2010(01)
[6]肾病综合征继发水痘-带状疱疹病毒感染20例分析[J]. 张宏斌.  中国中西医结合儿科学. 2009(03)
[7]免疫抑制宿主巨噬细胞Toll样受体的表达变化[J]. 顾克菊,马越云,苏明权,郝晓柯,于文彬.  第四军医大学学报. 2007(20)
[8]肾移植受者巨细胞病毒感染及免疫抑制剂对其的影响[J]. 许元文,梁艳冰,毛海萍,朱兰英,郑克立,吴培根,沈清瑞,余学清.  中华器官移植杂志. 2001(04)
[9]45例铜绿假单胞菌下呼吸道感染的临床和药敏分析[J]. 陈哲,王燕,陈光瑾,陈宝元,朱宝玉.  临床荟萃. 2000(11)



本文编号：3345548