PUMA在甲基苯丙胺介导周细胞迁移中的作用

发布时间：2021-08-16 12:20

　　目的:早期研究表明甲基苯丙胺通过损伤内皮细胞造成血脑屏障破坏,然而周细胞在此过程中的作用尚不明确。甲基苯丙胺能够引起周细胞迁移,从基底膜脱离,进而损伤血脑屏障,但是涉及这一过程的具体分子机制仍然不清楚。因此,本课题研究旨在阐明甲基苯丙胺引起周细胞迁移的相关分子机制。方法:应用Western blot和免疫荧光染色技术检测PUMA蛋白表达;应用Western blot检测integrinβ1和β3蛋白表达、信号通路相关蛋白以及其磷酸化形式;利用重组慢病毒建立稳定表达绿色荧光蛋白的周细胞细胞系C3H/10T1/2和原代人脑微血管周细胞（HBVPs）,应用细胞划痕实验和小室迁移实验检测其迁移能力;应用si RNA转染技术验证PUMA蛋白对周细胞迁移能力的影响;利用PUMA KO小鼠,结合免疫荧光染色和电镜的方法,从整体水平进一步验证PUMA在甲基苯丙胺介导周细胞迁移中的作用。结果:1)甲基苯丙胺上调周细胞中PUMA蛋白表达;2)PUMA蛋白表达上调介导甲基苯丙胺引起的周细胞迁移,沉默PUMA蛋白可以显著抑制甲基苯丙胺导致的周细胞迁移;3)信号通路MAPKs和PI3K/Akt磷酸化参与甲基苯丙... 

【文章来源】：东南大学江苏省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
前言
第一章 文献综述
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
第三章 实验结果
    3.1 甲基苯丙胺上调周细胞中PUMA蛋白表达
    3.2 PUMA介导甲基苯丙胺引起的周细胞迁移
    3.3 MAPKs和PI3K/Akt信号通路介导周细胞PUMA蛋白表达
    3.4 integrin β1 和 β3 介导甲基苯丙胺引起的周细胞迁移
    3.5 酪氨酸激酶Src和Pyk2参与甲基苯丙胺引起的周细胞迁移
    3.6 整体水平验证PUMA介导甲基苯丙胺引起的周细胞迁移
第四章 讨论
结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号：3345662