Lactobacillus buchneri TCP016胞外多糖的提取纯化及其对LPS/D-GalN肝损伤保护作用的研
发布时间：2021-09-03 23:40
乳酸菌胞外多糖是乳酸菌重要的代谢产物,具有多种生物学功能。本研究从实验室分离鉴定的益生性乳酸菌L.buchneri TCP016中分离纯化胞外多糖。利用LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤模型,研究EPS016对急性肝损伤的保护性能,探讨其对炎性细胞因子,抗氧化因子,凋亡因子及肠道菌群的影响。结果如下:1.通过醇提法从L.buchneri TCP016中提取多糖,经过去菌体、除蛋白、醇沉、冷冻干燥后得到粗多糖。粗多糖经DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B色谱柱纯化后得到均一组分-EPS016。通过红外和紫外光谱扫描分析,EPS016中不含有核酸和蛋白质,且具有多糖的特殊吸收峰,存在α-吡喃糖环构型。多角度激光光散射仪测定其分子量为8.509×104 Da,离子色谱检测单糖组成发现,EPS016主要由鼠李糖（Rha）、阿拉伯糖（Ara）、氨基葡萄糖（GlcN）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、木糖（Xyl）、甘露糖（Man）、半乳糖醛酸（GalA）和葡萄糖醛酸（GlcA）等9种单糖组成,主要组分摩尔比鼠李糖:葡萄糖...
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
乳酸菌胞外多糖促进人体健康的途径[23]
rose Fast Flow 离子柱纯化乙醇分级沉淀后得到的粗多糖用Tris-HCl溶解，过滤后采化进行进一步分离纯化。上样的多糖浓度为 10 mg/ml，上 M NaCl 的 Tris-HCl 洗脱液进行线性梯度洗脱，最后用管号为横坐标，以洗脱液中的多糖含量为纵坐标作图，得后得到三个组分，分别为 EPS1、EPS2 和 EPS3。由于这后洗脱下来的，表明 EPS1、EPS2 和 EPS3 这三种多糖均PS2 含量较少，故只收集 EPS3 的主峰即 35-56 管的样品析袋透析 2 d，并经真空冷冻干燥后得到初步纯化的多糖
图 2.2 EPS 经 Sepharose CL-6B 色谱柱洗脱曲线Fig. 2.2 Elution curve of the EPS on Sepharose CL-6B外光谱扫描了进一步证明经分子筛纯化的多糖组分是否含有核酸和蛋白质等杂质0 nm 范围内对其进行紫外光谱扫描，扫描结果如图 2.3。横坐标代表紫外波长代表响应强度（μAu）。结果显示，EPS016 只在 206 nm 处出现了多糖特有响应nm 和 280 nm 处均无特殊吸收峰出现，表明 EPS016 不含蛋白质和核酸这两
本文编号：3382102
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
乳酸菌胞外多糖促进人体健康的途径[23]
rose Fast Flow 离子柱纯化乙醇分级沉淀后得到的粗多糖用Tris-HCl溶解，过滤后采化进行进一步分离纯化。上样的多糖浓度为 10 mg/ml，上 M NaCl 的 Tris-HCl 洗脱液进行线性梯度洗脱，最后用管号为横坐标，以洗脱液中的多糖含量为纵坐标作图，得后得到三个组分，分别为 EPS1、EPS2 和 EPS3。由于这后洗脱下来的，表明 EPS1、EPS2 和 EPS3 这三种多糖均PS2 含量较少，故只收集 EPS3 的主峰即 35-56 管的样品析袋透析 2 d，并经真空冷冻干燥后得到初步纯化的多糖
图 2.2 EPS 经 Sepharose CL-6B 色谱柱洗脱曲线Fig. 2.2 Elution curve of the EPS on Sepharose CL-6B外光谱扫描了进一步证明经分子筛纯化的多糖组分是否含有核酸和蛋白质等杂质0 nm 范围内对其进行紫外光谱扫描，扫描结果如图 2.3。横坐标代表紫外波长代表响应强度（μAu）。结果显示，EPS016 只在 206 nm 处出现了多糖特有响应nm 和 280 nm 处均无特殊吸收峰出现，表明 EPS016 不含蛋白质和核酸这两
本文编号：3382102
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