gMYL6可溶性表达及其提高NK细胞杀伤活性的研究

发布时间：2021-09-08 10:08

　　目的1鉴定并解析编码ACBPs中另一活性组分gMYL6的遗传信息,获取gMYL6全序列信息。2构建以大肠杆菌为宿主的gMYL6生物合成体系,通过添加聚阳离子氨基酸标签的方式对gMYL6进行可溶性表达,以期产生具有更高溶解性的gMYL6重组蛋白。3对gMYL6及其重组蛋白进行NK细胞杀伤活性的评价,检测其对NK细胞杀伤活性的影响。方法1采用液质联用系统（EASYnLCII-Nano-HPLC）、以Xcalibur 2.0.7软件辅助获取多肽数据,通过对多肽数据进行NCBInr数据库搜索结合BLAST分析,获取gMYL6的生物合成信息。2以E.coli BL21（DE3）为表达宿主、pET21a（+）为表达载体,在gMYL6多肽序列末端添加不同长度的聚阳离子氨基酸标签（1¹0个赖氨酸、1¹0个精氨酸）,构建gMYL6的异源生物合成体系,对重组蛋白进行SDS-PAGE及定量分析。同时设置不同诱导温度,观察温度对gMYL6及gMYL6-6K表达的影响。3通过CCK8法和流式细胞术检测gMYL6及gMYL6-6K对NK细胞杀伤活性及细胞表型的影响。结果... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ACBPs片段的质谱图

华北理工大学硕士学位论文图 3 以 pET21a (+)为载体的重组 gMYL6 的表达组件的结构图Fig.3 Schematic diagram for the structures of recombinant gMYL6 expression cassettes inplasmid pET21a (+) derivatives

第 2 章 gMYL6 的可溶性表达表 4 添加不同长度标签的重组 gMYL6 的定量分析4 Quantitative analysis of recombinant gMYL6s with different lengthsYield of target protein (mg/L)Arginine Lysine 2.641* 1.54651.454 1.8255- -1.504 1.432- -1.9615 23.7425***1.6865 1.46951.483 1.44352.6425* 9.152*- 8.502*

【参考文献】：
期刊论文
[1]2012年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J]. 陈万青,郑荣寿,张思维,曾红梅,左婷婷,贾漫漫,夏昌发,邹小农,赫捷.  中国肿瘤. 2016(01)
[2]抗肿瘤小分子多肽的研究进展[J]. 张冉,劳兴珍,郑珩.  氨基酸和生物资源. 2012(04)
[3]海洋生物抗肿瘤多肽海兔毒素10及其衍生物的研究进展[J]. 曹王丽,宋佳希,李芳秋.  医学研究生学报. 2011(11)
[4]MTT法和CCK-8法检测细胞活性之测试条件比较[J]. 熊建文,肖化,张镇西.  激光生物学报. 2007(05)
[5]抗癌活性肽对鼻咽癌细胞周期的影响[J]. 赵媛媛,彭诗东,苏秀兰.  中华耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2006(08)
[6]抗癌活性肽对荷白血病鼠的作用[J]. 侯金凤,闫美蓉,闫晓红,荣雅宁,焦团梅,苏秀兰.  内蒙古医学院学报. 2004(01)
[7]抗胃癌生物活性肽对荷胃癌裸鼠LDH同工酶谱的影响[J]. 闫美荣,苏秀兰,刘庆平.  肿瘤防治杂志. 2002(04)
[8]细胞因子模拟肽/非肽刺激造血的研究进展[J]. 袁志宏,奚永志,孔繁华.  中国实验血液学杂志. 2002(01)



本文编号：3390597