基于人α防御素5改造的新型纳米抗生素的杀菌效果及机制研究

发布时间：2021-09-17 06:18

　　第一部分人α防御素5改造的纳米抗生素的构建及表征研究目的:人α防御素5（humanα-defensin5,HD5）是人小肠潘氏细胞分泌产生的一种阳离子抗菌肽,由32个氨基酸组成。对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等多种病原菌均有杀灭作用。但是其杀菌作用容易受到氯化钠等多种因素的干扰,且作为多肽类物质的生物稳定性差,容易被酶降解。基于纳米科技进行药物改造已经成为最近研究的热点。因此,本部分研究致力于将HD5纳米化改造,研究改造后的纳米颗粒大小、电位及稳定性等。研究方法:设计HD5改造体的分子结构,具体在HD5的氮端或者碳端增加疏水性的肉豆蔻酸,为了避免肉豆蔻酸对HD5的分子造成影响,增加甘氨酸作为连接HD5和肉豆蔻酸的中间体。此外,由于HD5的碳端不存在游离的氨基,在碳端改造时,又在HD5的碳端连接一个额外的赖氨酸,在该赖氨酸的ε氨基上连接肉豆蔻酸。氮端肉豆蔻酰化的改造体命名为myr-HD5,碳端肉豆蔻酰化的改造体命名为HD5-myr。通过固相合成的方法合成。通过高效液相色谱分离并验证纯度,通过质谱分析验证分子的成功合成。将多肽溶解在水中,应用动态光散射检测纳米颗粒的直径及 Zeta 电位。应用... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：132 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图２?ＨＤ５的空间结构

序列用彩色表示。可见人防御素中有许多保守的氨基酸序列。??１?ＨＤ５的结构特点??ＨＤ５由３２个氨基酸组成。其氨基酸序列如图１所示。含有６个带正电荷的精??氨酸和２个带负电荷的谷氨酸，整体带４个正电荷。分子内有６个保守的半胱氨??酸，按Ｃｙｓｌ－Ｃｙｓ６，?Ｃｙｓ２－Ｃｙｓ４，?Ｃｙｓ３－Ｃｙｓ５的模型形成３个分子内二硫键。３个二??硫键使ＨＤ５形成一个“发卡”样的空间结构，分子内形成反向平行的（３折叠结构（图??２）。??图２?ＨＤ５的空间结构。半胱氨酸和二硫键表示为黄色，片状的箭头代表｜３折叠结??８６??

１．１?ＨＤ５的两亲性??ＨＤ５分子中有许多疏水性的氨基酸（非极性氨基酸），空间位置模拟之后发现??它们基本位于一侧。如图３所示。??１８０?二?Ｖ??图３?ＨＤ５的疏水性氨基酸分布在一侧。蓝色代表疏水性的氨基酸，绿色代表亲水??性的氨基酸。??１．２?ＨＤ５的正电荷属性??ＨＤ５分子中有６个带正电荷的精氨酸和２个带负电荷的谷氨酸，整体带４个??正电荷，如图４所示，ＨＤ５的正电荷主要位于分子的一侧。??８７??


本文编号：3398134