蛋白激酶C-θ在吗啡诱导Th2细胞分化中的作用

发布时间：2021-09-22 11:47

　　目的探讨蛋白激酶C-θ（PKC-θ）在吗啡诱导初始T细胞分化模型中的作用及潜在机制。方法取小鼠脾脏,制备单细胞悬液,使用分离试剂盒获得初始T细胞。将提纯的初始T细胞分为六组:对照组、吗啡组、纳洛酮（吗啡拮抗剂）组、AEB071（PKC-θ抑制剂）组、吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组。按组别加入不同刺激物培养,收取细胞,采用流式细胞仪检测Th1和Th2细胞数量,采用ELISA法检测细胞因子IL-4和IFN-γ浓度,采用Western blot法检测PKC-θS676、T538两个位点的磷酸化水平,采用实时荧光定量PCR（qPCR）检测GATA3 mRNA表达量,采用凝胶迁移实验（EMSA）检测GATA3转录活性。结果与对照组比较,吗啡组Th2细胞数量明显增多,IL-4浓度明显升高,PKC-θS676、T538两个位点的磷酸化水平明显升高,GATA3 mRNA表达量及转录活性均明显升高（P<0.01）。与吗啡组比较,吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组Th2细胞数量明显减少,IL-4浓度明显降低,PKC-θS676、T538两个位点的磷酸化水平明显降低,GATA3 mRNA表达量... 

【文章来源】：临床麻醉学杂志. 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

六组细胞GATA3转录活性的比较

与对照组比较,吗啡组Th2细胞数量明显增多(P<0.01)。与吗啡组比较,吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组Th2细胞数量明显减少(P<0.01)。与纳洛酮组比较,吗啡+纳洛酮组Th2细胞数量明显增多(P<0.01)。与AEB071组比较,吗啡+AEB071组Th2细胞数量明显增多(P<0.01)。六组Th1细胞数量差异无统计学意义(图1)。与对照组比较,吗啡组细胞因子IL-4浓度明显升高(P<0.01);与吗啡组比较,吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组细胞因子IL-4浓度明显降低(P<0.01)。纳洛酮组和吗啡+纳洛酮组细胞因子IL-4浓度差异无统计学意义。AEB071组和吗啡+AEB071组细胞因子IL-4浓度差异无统计学意义。六组细胞因子IFN-γ浓度差异无统计学意义(图2—3)。

与对照组比较,吗啡组细胞因子IL-4浓度明显升高(P<0.01);与吗啡组比较,吗啡+纳洛酮组和吗啡+AEB071组细胞因子IL-4浓度明显降低(P<0.01)。纳洛酮组和吗啡+纳洛酮组细胞因子IL-4浓度差异无统计学意义。AEB071组和吗啡+AEB071组细胞因子IL-4浓度差异无统计学意义。六组细胞因子IFN-γ浓度差异无统计学意义(图2—3)。图3 六组细胞因子TNF-γ浓度的比较

【参考文献】：
期刊论文
[1]AKT和PKCθ与吗啡抑制辅助性T淋巴细胞分化的关系[J]. 毛毛,孙杰,钱燕宁.  中华麻醉学杂志. 2014 (02)



本文编号：3403707