体积调节性氯离子通道阻滞剂NPPB对低渗条件下小胶质细胞活化的影响

发布时间：2021-09-27 23:05

　　目的探讨体积调节性氯离子通道（volume regulated anion channel, VRAC）阻滞剂NPPB（5-nitro-2-3-phenylpropylamino benzoic acid）对低渗状态下小胶质细胞活化的影响及机制。方法采用小胶质细胞系BV2细胞,分为对照组、低渗组、低渗+NPPB干预组,低渗+U0126组,通过LDH试剂盒检测NPPB对BV2细胞的毒性作用;采用免疫荧光技术和FITC标记鬼笔环肽染色检测BV2细胞形态变化及细胞面积;western blot检测BV2细胞MAPK信号通路的变化。结果 50μmol和100μmol的NPPB对BV2细胞无明显毒性作用。与对照组比较,低渗干预后BV2细胞迅速由静息状态下的分支状转变为活化的阿米巴状,IBA1表达显著增加,细胞面积显著增大;NPPB显著逆转低渗条件下BV2细胞形态变化,减少IBA1表达及细胞面积（P<0.05）;与对照组比较,低渗干预显著增加p-Erk蛋白表达（P<0.05）,而Erk、p-Jnk及p-p38蛋白表达水平无明显差异（P>0.05）,NPPB显著降低BV2细胞p-E... 

【文章来源】：卒中与神经疾病. 2020,27(03)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

不同水平NPPB对BV2细胞毒性的影响

VRAC参与调节小胶质细胞的活化过程、细胞增殖、趋化迁移、炎性分泌、吞噬过程等[6-10],然而目前研究仍不清楚VRAC如何调节小胶质细胞的形态改变、体积变化及其机制。正常生理情况下小胶质细胞为静息状态,其形态特点为分支状,且低表达免疫分子。中枢神经系统受损后小胶质细胞被激活为成熟的免疫活性细胞。激活的小胶质细胞发生形态改变,由分支状变成阿米巴状, 这种形态变化有助于小胶质细胞入侵病原体和向受损伤部位的迁移[12]。BV2细胞高度纯化,具备原代小胶质细胞形态学、表型及各项生理特点,且研究报道BV2细胞培养基渗透压降低20%即可激活VRAC,因此本研究采用低渗培养基干预BV2细胞模拟缺血后脑水肿病理状态。Ducharme等研究发现,VRAC激活可促进小胶质细胞由分支状向阿米巴状转化[6]。Han等研究报道,VRAC抑制剂DCPIB可显著抑制小胶质细胞增殖、迁移及炎性分泌[13]。本研究结果也发现VRAC被NPPB阻滞后可逆转BV2细胞的形态改变,降低IBA1的表达,减少细胞面积,提示VRAC可能参与了低渗诱导的BV2细胞的激活过程。图3 NPPB对低渗条件下BV2细胞MAPK信号转导通路的影响

NPPB对低渗条件下BV2细胞MAPK信号转导通路的影响


本文编号：3410780