达格列净对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞自噬的影响及机制研究
发布时间：2021-09-28 04:29
目的:探讨达格列净（Dapagliflozin,DAPA）对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC）自噬的调控及机制。材料与方法:将HUVEC进行复苏,培养、传代,取对数增长期的HUVEC进行下列研究:1、观察不同浓度DAPA作用不同时间后对高糖诱导的HUVEC细胞活力的影响:分别处理24h和48h,每个时间点分8组:正常对照（5.5mM）组、高糖（30mM）组、高糖+DAPA（10μM,20μM,30μM,50μM,80μM,120μM）组。MTT检测各组吸光光度值,确定达格列净干预的最佳浓度及处理时间;2、探讨DAPA对高糖诱导HUVEC自噬的影响及可能机制,分为5组:正常对照组（A组）、高糖组（B组）、高糖+DAPA最佳浓度组（C组）、高糖+Rapamycin（雷帕霉素,100nM）组（D组）、高糖+DAPA最佳浓度+Rapamycin组（E组）。Western Blot检测自噬信号因子LC3-II/LC3-I、P62、AMPK和mTOR的蛋白表达水平,RT-...
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组在OD568nm处的OD值（a）、（c）；达格列净不同浓度组细胞存活率（b）、（d）（±s，n=3）
南华大学硕士学位论文14糖+DAPA80μM组OD值较高糖组明显升高，细胞活力得到改善，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）细胞处理48h后，MTT结果如图3.1中（c）、（d）所示，与正常对照组比较，高糖组、高糖+DAPA各浓度组OD值均不同程度降低，存活率下降明显，增殖受抑制，差异有统计学意义（P＜0.05）。相比高糖组，不同浓度DAPA干预后的各组，OD值均升高，但DAPA10μl时OD值升高不明显（P＞0.05），其余各组OD值均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。DAPA在一定浓度范围内（10-50μM），各组细胞OD值与浓度呈正相关（P＜0.05）。总体来说，DAPA高浓度组比低浓度组对细胞促增殖作用更明显，且在DAPA50μM促细胞增殖作用最强。正常对照组高糖组高糖+DAPA10μM高糖+DAPA20μM高糖+DAPA30μM高糖+DAPA50μM高糖+DAPA80μM高糖+DAPA120μM图3.2（48h）显微镜下各组HUVEC细胞学形态（100X）经48h处理后各组细胞学形态（显微镜下观察）：与正常对照组比较，高糖
各组LC3-II、LC3-I表达（a）、P62表达（c）；各组LC3-II/LC3-I值（b）、P62/β-actin值（d）（±s，n=3）
本文编号：3411243
【文章来源】：南华大学湖南省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组在OD568nm处的OD值（a）、（c）；达格列净不同浓度组细胞存活率（b）、（d）（±s，n=3）
南华大学硕士学位论文14糖+DAPA80μM组OD值较高糖组明显升高，细胞活力得到改善，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）细胞处理48h后，MTT结果如图3.1中（c）、（d）所示，与正常对照组比较，高糖组、高糖+DAPA各浓度组OD值均不同程度降低，存活率下降明显，增殖受抑制，差异有统计学意义（P＜0.05）。相比高糖组，不同浓度DAPA干预后的各组，OD值均升高，但DAPA10μl时OD值升高不明显（P＞0.05），其余各组OD值均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。DAPA在一定浓度范围内（10-50μM），各组细胞OD值与浓度呈正相关（P＜0.05）。总体来说，DAPA高浓度组比低浓度组对细胞促增殖作用更明显，且在DAPA50μM促细胞增殖作用最强。正常对照组高糖组高糖+DAPA10μM高糖+DAPA20μM高糖+DAPA30μM高糖+DAPA50μM高糖+DAPA80μM高糖+DAPA120μM图3.2（48h）显微镜下各组HUVEC细胞学形态（100X）经48h处理后各组细胞学形态（显微镜下观察）：与正常对照组比较，高糖
各组LC3-II、LC3-I表达（a）、P62表达（c）；各组LC3-II/LC3-I值（b）、P62/β-actin值（d）（±s，n=3）
本文编号：3411243
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