5-甲氧基黄酮的无义突变通读活性研究

发布时间：2021-10-13 00:53

　　目的:探讨5-甲氧基黄酮（5-methoxyflavone）对基因无义突变的通读活性,研究该化合物对无义突变所导致的肿瘤及其它疾病治疗的药物潜力。方法:通过本课题组已经建立的无义突变虫荧光酶细胞模型,初步筛选出了能够进行无义突变虫荧光素酶通读的阳性通读剂黄酮类化合物5-甲氧基黄酮。接着用5-甲氧基黄酮处理含有无义突变虫荧光素酶的HEK293MUT细胞,化学发光法检测虫荧光素酶活性,Western blot检测虫荧光素酶蛋白水平;最后用5-甲氧基黄酮处理含有无义突变APC基因的人结肠癌细胞HT-29,Western blot检测APC蛋白及下游蛋白β-连环蛋白表达;CCK-8实验分析5-甲氧基黄酮的细胞毒性;利用相同方法对与5-甲氧基黄酮拥有相似结构的化合物进行实验分析。结果:在初步确认5-甲氧基黄酮具有无义突变通读活性后,进一步进行化合物的检测和分析,发现5-甲氧基黄酮在HEK293MUT细胞中表现出的通读效率相比G418更高（P<0.05）。在HT-29细胞中,随着剂量升高,5-甲氧基黄酮对无义突变APC基因蛋白的表达恢复也逐渐增强。并且,5-甲氧基黄酮对无义突变APC基因的通... 

【文章来源】：武汉科技大学湖北省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

药物处理HEK293MUT细胞后荧光素酶相对发光值

武汉科技大学硕士学位论文10时，5-甲氧基黄酮对无义突变荧光素酶蛋白的表达恢复能力也同样要优于参照物G418。图2药物处理HEK293MUT细胞后荧光素酶蛋白表达恢复结果2.3不同浓度5-甲氧基黄酮对HT-29细胞无义突变APC基因蛋白表达的影响实验结果如图3所示，不同浓度5-甲氧基黄酮处理过后的HT-29细胞均表达APC蛋白，而且随着浓度的升高，HT-29细胞APC蛋白表达也有所提升。这表明5-甲氧基黄酮对HT-29细胞无义突变APC基因蛋白表达恢复产生了影响。同时还发现，5-甲氧基黄酮对HCT-116细胞内正常APC基因表达无明显作用。图3不同浓度5-甲氧基黄酮对HT-29细胞无义突变APC基因蛋白表达的影响

武汉科技大学硕士学位论文10时，5-甲氧基黄酮对无义突变荧光素酶蛋白的表达恢复能力也同样要优于参照物G418。图2药物处理HEK293MUT细胞后荧光素酶蛋白表达恢复结果2.3不同浓度5-甲氧基黄酮对HT-29细胞无义突变APC基因蛋白表达的影响实验结果如图3所示，不同浓度5-甲氧基黄酮处理过后的HT-29细胞均表达APC蛋白，而且随着浓度的升高，HT-29细胞APC蛋白表达也有所提升。这表明5-甲氧基黄酮对HT-29细胞无义突变APC基因蛋白表达恢复产生了影响。同时还发现，5-甲氧基黄酮对HCT-116细胞内正常APC基因表达无明显作用。图3不同浓度5-甲氧基黄酮对HT-29细胞无义突变APC基因蛋白表达的影响


本文编号：3433639