抗体偶联药物的设计及其特异性抗肿瘤活性研究

发布时间：2021-10-29 12:50

　　近年来,Adcetris（?）和 Kadcyla（?）等抗体偶联药物（antibody-drug conjugates,ADCs）在临床上取得了显著的成功,再一次证实ADCs是一种对抗癌症的强大武器。但传统的偶联方法通过抗体上赖氨酸残基或链间二硫键还原产生的半胱氨酸残基共价连接细胞毒性药物,所获得的ADCs的药物抗体偶联比（drug to antibody ratio,DAR）和偶联位点的变动性较大,导致较大的异质性。因此,定点偶联技术亟待开发。1直接酶法制备抗体偶联药物Sortase A酶（SrtA）介导的偶联反应能特异性识别LPXTG并连接一系列含寡甘氨酸的底物,但由于野生型SrtA的动力学性质比较差,为保证有效的偶联,需要加大酶的用量,延长反应时间,限制了其广泛应用。前期研究中我们利用野生型SrtA（AN59）催化抗CD20抗体ofatumumab（OFA）定点偶联海兔毒素衍生物（Monomethyl auristatin E,MMAE）制备抗 CD20 抗体偶联药物 OFA-vcMMAE。最近报道筛选出了活性更强的突变型SrtA（7M）,我们表达了野生型SrtA（AN59）和突... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１抗体偶联药物结构示意图

早在一个世纪前，德国免疫学者Ｐａｕｌ?Ｅｈｒｌｉｃｈ就提出了“魔术子弹”的概念［１］。??抗体偶联药物（ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ?ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ，?ＡＤＣｓ）由抗体、细胞毒性药物、以及??连接物（ｌｉｎｋｅｒ）三部分组成（图１．１），以抗体为载体，选择性将“弹头”药物送至??靶细胞，与肿瘤细胞表面特异性抗原结合，并通过细胞内吞作用进入溶酶体，在??溶酶体内被组织蛋白酶等水解酶水解，释放出细胞毒性药物，特异性杀死肿瘤细??胞（图１．２）。与化疗和联合治疗相比，ＡＤＣｓ选择性好，能显著减少脱靶毒性，??招宽治疗窗。近年来，Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ?ｖｅｄｏｔｉｎ?（Ａｄｃｅｔｒｉｓ？，ＳＧＮ－３５）和Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ??ｅｍｔａｎｓｉｎｅ?（Ｋａｄｃｙｌａ？，Ｔ－ＤＭ１）等ＡＤＣｓ在临床上取得了显著的成功，再一次证实??ＡＤＣｓ是一种对抗癌症的强大武器［２－５］。??Ｈｉ?下??图１．１抗体偶联药物结构示意图。ＡＤＣｓ由抗体、细胞毒性药物、以及连接物三部??分组成。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｈｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ?ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．?ＡＤＣｓ?ｃｏｎｓｉｓｔ?ｏｆ?ａ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ??ｄｒｕｇ?ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ?ｔｏ?ａ?ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ?ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｂｙ?ｍｅａｎｓ?ｏｆ?ａ?ｓｅｌｅｃｔ?ｌ

（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ，Ｒｉｔｕｘａｎ？）、奥法木单抗（Ｏｆａｔｕｍｕｍａｂ，Ａｒｚｅｒｒａ？）、托西莫单抗??（Ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ，ＢｅｘｘａｒＢ）和阿托珠单抗（Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ，ＧａｚｙｖａＫ）等。??抗ＣＤ２０抗体通过数种机制导致肿瘤细胞死亡［１０］（图１．３）。首先，抗体和ＣＤ２０??的结合可通过Ｃｌｑ激活补体级联反应，进而导致细胞死亡或补体蛋白在细胞膜上??沉积，这种现象被称为补体依赖的细胞毒作用（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，??ＣＤＣ）。另外，抗体结合的靶细胞也可通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用??（ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｃｅｌｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，?ＡＤＣＣ）而被表迗Ｆｅｙ受体的免疫??细胞杀死。此外，和ＣＤ２０结合的抗体也有可能发挥直接抗增殖效应或主动诱导细??胞凋亡。??典法木ｍ抗??结合位说??补体介导的溶怍用?利妥执??托西興电ｍ??蚺台ｃｈ?ｗ托珠？ｍ??？Ｘ?＼?坫—？??？隱４丨Ｈ??？合抗体?人类伉休??Ｉ利妥情》沆）?法木明??和妞相生长抑制??图１．３抗ＣＤ２０抗体的作用机制［１（）］。抗体结合ＣＤ２０通过补体依赖的细胞毒作用、??抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用以及直接抗增殖效应诱导细胞凋亡。??Ｆｉｇｕｒｅ?１．３?Ｔｈｒｅｅ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ?ｏｆ?ａｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｎｔｉ－ＣＤ２０?ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ１１０］．?Ｉｎ??ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ?（ＣＤＣ）


本文编号：3464692