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盐酸右美托咪定对脂多糖诱导Kupffer细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体通路的研究

发布时间:2021-10-30 05:36
  目的探讨盐酸右美托咪定对脂多糖(LPS)诱导Kupffer细胞(KCs)核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路的影响。方法用500 ng·mL-1 LPS处理KCs 24 h,构建炎性因子释放模型细胞。将模型细胞随机分为模型组和低、中、高剂量实验组,另取正常KCs作为空白组。空白组和模型组均不给予药物处理,正常培养7 h;低、中、高剂量实验组分别给予50,200和500 ng·mL-1盐酸右美托咪定处理1 h,继续孵育6 h。用噻唑蓝法检测各组细胞的存活率,用Western Blotting法检测各组细胞炎症小体相关蛋白的表达水平。结果干预后,低、高剂量实验组和模型组、空白组的细胞存活率分别为(60.11±4.69)%,(85.02±5.04)%,(51.24±4.22)%和(100.00±5.24)%,NLRP3蛋白相对表达水平分别为2.49±0.28,1.21±0.21,3.37±0.30和1.02±0.22,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1相对表达水平分别为2.68±0.26,1.17±0.22,3.54±0.34和1.... 

【文章来源】:中国临床药理学杂志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章页数】:4 页

【文章目录】:
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 模型构建[4]
        2.3 细胞分组与给药方法
        2.4 主要观察指标
            2.4.1 用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的存活率[5]
            2.4.2 用Western Blotting法检测各组细胞炎症小体相关蛋白的表达水平[4]
        2.5 亚组观察指标
            2.5.1 用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6和IL-1β水平[6]
            2.5.2 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测炎症小体相关分子mRNA的表达水平
    3 统计学处理
结 果
    1 5组细胞存活率的比较
    2 5组细胞炎症小体相关蛋白表达水平的比较
    3 5组细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β释放量的比较
    4 5组细胞中炎症小体相关分子mRNA表达水平的影响
讨 论



本文编号:3466157

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