酶法合成组胺的研究

发布时间：2021-11-05 21:21

　　为探究生物催化法合成组胺,通过对IPTG浓度、诱导时间和酶学性质的研究,确定组氨酸脱羧酶诱导表达条件以及最适反应条件.结果表明:不同IPTG诱导浓度对酶活影响不大;酶活随着诱导时间的增加而升高;酶反应最适温度为30℃,pH为6.0;随着产物浓度增加,酶活降低,具有产物抑制现象;5%底物时转化率达到60%,3%底物时转化率达到97.7%.可见,该组氨酸脱羧酶有工业应用开发潜力. 

【文章来源】：杭州师范大学学报(自然科学版). 2019,18(03)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图２ＩＰＴＧ浓度对酶活的影响Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＩＰＴＧｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎａｃｔｉｖｉｔｙ

当ＩＰＴＧ浓度大于０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ时，酶活随着ＩＰＴＧ浓度的升高而降低．图３反映了ＩＰＴＧ诱导时间对酶活的影响，结果表明，诱导时间对ＨＤＣ活力影响显著，诱导时间越长，酶活越高．当诱导时间为２ｈ时，产率为９％左右；当诱导时间为１０ｈ时，产率达到２９％，诱导时间为２０ｈ，产率达到３４％．图２ＩＰＴＧ浓度对酶活的影响Ｆｉｇ．２ＥｆｆｅｃｔｏｆＩＰＴＧｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎａｃｔｉｖｉｔｙ图３ＩＰＴＧ诱导时间对酶活的影响Ｆｉｇ．３ＥｆｆｅｃｔｏｆＩＰＴＧｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｉｍｅｏｎａｃｔｉｖｉｔｙ２．３ｐＨ和温度对酶活的影响不同ｐＨ对酶活的影响见图４Ａ：当ｐＨ为６．０时，组氨酸脱羧酶具有最大的酶活，ｐＨ为５．５时其酶６７２杭州师范大学学报（自然科学版）２０１９年

活略有降低；当ｐＨ大于６．０时，酶活随着ｐＨ的升高而降低；当ｐＨ为８．０时，其相对酶活为１２．７％．不同温度对酶活的影响见图４Ｂ：当温度小于３０℃时，随着温度的上升，ＨＤＣ活力逐渐升高；当温度大于３５℃时，酶活随着温度的升高而逐渐降低．因此反应温度可以选择３０℃或是３５℃．组氨酸脱羧酶ｐＨ稳定性实验结果如图４Ｃ所示．从总体上来看，酶在ｐＨ６．０的条件下最稳定，ｐＨ５．５稳定性最差．处理时间为４ｈ时，由ｐＨ６．０缓冲液处理的组氨酸脱羧酶活性为初始酶活的８０％以上，由ｐＨ６．５缓冲液处理的残余酶活为７５．０％，由ｐＨ５．５缓冲液处理的酶活为５６．９％．当处理时间为９ｈ时，ｐＨ５．５和６．５下的酶完全失活，ｐＨ６．０下的酶活降低至２０％左右．组氨酸脱羧酶温度稳定性实验结果如图４Ｄ所示，经３个温度处理０．５ｈ之后酶活均随着时间的增加而降低．２５℃条件下组氨酸脱羧酶稳定性最好，处理９ｈ后相对酶活为８６％，而３０和３５℃条件下残余酶活分别是６０．５％和２８．４％．Ａ：不同ｐＨ对ＨＤＣ活力的影响；Ｂ：不同温度对ＨＤＣ活力的影响；Ｃ：ＨＤＣ在ｐＨ值５．５，６．０，６．５条件下的稳定性；Ｄ：ＨＤＣ在温度为２５，３０，３５℃条件下的稳定性．图４ｐＨ和温度对酶活的影响Ｆｉｇ．４ＥｆｆｅｃｔｏｆｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐＨｏｎａｃｔｉｖｉｔｙ２．４底物浓度对酶活的影响添加不同底物浓度对

【参考文献】：
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本文编号：3478529