双时相门冬胰岛素40注射液的研制及其生物学活性研究

发布时间：2017-05-06 17:16

  本文关键词：双时相门冬胰岛素40注射液的研制及其生物学活性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研制双时相门冬胰岛素40注射液;初步探讨双时相门冬胰岛素40注射液对T1DM大鼠血糖影响及其免疫调节作用。方法:(1)通过处方研究和工艺开发研制出双时相门冬胰岛素40注射液,并对其制剂质量进行研究;(2)取I型糖尿病模型大鼠注射门冬40注射液,每日一次,连续干预6周;实验期间观察各组大鼠的一般状况,监测大鼠的体重、饮水量、排尿量、摄食量及空腹血糖;(3)在给药前、给药3周、给药6周,采用流式细胞术检测大鼠外周血CD4+CD25+Treg细胞的变化,采用ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-10、TGF-β细胞因子的水平;给药6周后采用RT-PCR法检测大鼠外周血淋巴细胞Foxp3m RNA的水平,HE染色法观察各组大鼠胰腺组织病理变化。实验同时设正常对照组、模型对照组和阳性药物对照组。结果:(1)研制出的门冬胰岛素40注射液按药典和企业标准各项指标均符合要求,制剂稳定性良好;(2)实验组大鼠一般状况:实验组大鼠一般状况良好,“三多一少”典型症状改善明显,体重呈现上升的趋势,在第6周(258.4g)明显高于模型组大鼠(154.3g)(P0.05);胰腺组织HE染色结果显示,给予药物6周后,实验组大鼠胰岛组织相对较好,比正常的胰腺组织差,但比模型组好,与药物对照组相比,无明显差异;治疗7天后,实验组大鼠血糖(7.75mmol/L)显著低于模型组(24.93mmol/L),第21天、42天实验组显著低于模型组(P0.05)。(3)CD4+CD25+Treg细胞流式细胞术检测结果:药物干预6周后,实验组Treg细胞(1.84%)高于模型组(1.46%)具有明显差异性(P0.05),低于正常组(2.23%)有明显差异性(P0.05)。(4)Foxp3 m RNA相对定量统计结果:给与药物治疗6周后,实验组(3.2368)明显高于正常组(P0.05),明显低于模型组(6.7928)(P0.05)。(5)细胞因子检测结果:1给药6周后,实验组INF-γ含量(111.87pg/ml)比给药前低(140.04pg/ml),明显低于模型组INF-γ含量(185.90pg/ml)(P0.05);2给药6周后,实验组IL-10含量(1.45ng/ml)比给药前高(1.15ng/ml),高于模型组IL-10含量(0.93ng/ml)(P0.05);3给药6周后,实验组TGF-β含量(114.21pg/ml)　比给药前高(97.19pg/ml),高于模型组TGF-β含量(79.13pg/ml)(P0.05)。结论:(1)采用本方法研制的双时相门冬胰岛素40注射液质量稳定、均一;(2)双时相门冬胰岛素40注射液能降低I型糖尿病大鼠的血糖含量,减轻I型糖尿病大鼠“三多一少”的症状,减轻损伤I型糖尿病大鼠的胰岛组织;(3)通过双时相门冬胰岛素40注射液治疗糖尿病大鼠,可提高CD4+CD25+Treg细胞数,上调Foxp3m RNA表达;同时降低糖尿病大鼠IFN-γ,上调IL-10、TGF-β;通过细胞因子和Treg细胞免疫调节达到治疗效果。
【关键词】：双时相门冬胰岛素 生物学活性 降糖效果 CD4+CD25+Treg细胞 细胞因子
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R977.15
【目录】：

• 中英缩略词对照表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 第一部分:双时相门冬胰岛素40注射液的研制10-24
• 前言10-12
• 材料与方法12-16
• 结果16-20
• 讨论20-21
• 结论21-22
• 参考文献22-24
• 第二部分:双时相门冬胰岛素40对T1DM大鼠血糖的影响24-37
• 前言24-25
• 材料与方法25-28
• 结果28-33
• 讨论33-34
• 结论34-35
• 参考文献35-37
• 第三部分:双时相门冬胰岛素40对T1DM大鼠CD4~+CD25~+Treg细胞及细胞因子的影响37-56
• 前言37-39
• 材料与方法39-45
• 结果45-52
• 讨论52-53
• 结论53-54
• 参考文献54-56
• 综述:糖尿病治疗药物门冬胰岛素的研究进展56-64
• 参考文献61-64
• 致谢64-65
• 作者简介65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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7 王弘s

本文编号：348810