泮托拉唑提高人口腔上皮癌KB/V耐药细胞对长春新碱的化疗敏感性及机制研究

发布时间：2021-11-14 17:54

　　研究背景与目的口腔癌是一种不断增长的、严重威胁人类健康的全球恶性疾病。目前,临床上口腔癌常规的治疗方法主要有手术、放疗、化疗以及不同方法联合治疗。近年来,尽管在临床诊断及治疗方面都有了很大的进展,但口腔癌患者的五年生存率仍处于较低水平。长春新碱（Vincristine,VCR）,一种微管蛋白聚合抑制剂,是口腔癌治疗的基础化疗药物之一。与大多数抗肿瘤药物一样,多药耐药是限制VCR在临床应用的主要因素。质子泵抑制剂（Proton pump inhibitors,PPIs）,是通过降低胃壁细胞H+-K+-ATPase活性而抑制胃酸分泌的一类药物,近年来其抗肿瘤活性受到研究者的广泛关注,并且与化疗药物合用能够增强治疗效果,但其作用机制并不完全明确。PPIs安全性较好,本身具有抗肿瘤作用,在联用中可减小化疗药物剂量,降低毒性,还有临床实验报道PPIs联用镇吐剂可减轻化疗导致的胃肠道反应。在本论文中,我们从细胞和动物两个方面观察研究了质子泵抑制剂泮托拉唑（Pantoprazole,PPZ）与VCR合用对人口腔上皮癌KB/V耐药细胞的增殖、凋亡、周期、侵袭转移以及肿瘤组织生长的影响,并对其可能的作用... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
符号说明
前言
    1. 肿瘤多药耐药性(MDR)
        1.1 P-gp与MDR
        1.2 细胞凋亡与MDR
        1.3 PI3K/Akt/mTOR信号通路与MDR
    2. 长春新碱在癌症治疗中的临床应用现状
    3. 质子泵抑制剂(PPIs)抗肿瘤作用的研究现状
        3.1 PPIs简介
        3.2 PPIs抗肿瘤作用的研究现状
    4. 本课题的主要研究内容
实验材料
    1. 化合物
    2. 细胞株
    3. 实验动物
    4. 试剂
    5. 试剂配制
    6. 仪器设备
实验方法
    1. 细胞培养
    2. 细胞生长抑制试验
    3. 克隆形成抑制试验
    4. Hoechst 33342染色实验
    5. Annexin V-FITC/PI双染实验
    6. 细胞周期检测
    7. 划痕实验
    8. Transwell侵袭与迁移实验
    9. 罗丹明123胞内蓄积实验
    10. 细胞外pH值检测
    11. Western blotting实验
    12. 裸鼠移植瘤生长抑制实验
    13. 统计学数据分析
实验结果
    1. PPZ对KB及KB/V细胞增殖的影响
    2. PPZ增强VCR对KB及KB/V细胞的细胞毒作用
        2.1 PPZ增强VCR对KB及KB/V细胞的体外生长抑制作用
        2.2. PPZ增强VCR对KB及KB/V细胞的克隆形成抑制作用
        2.3 PPZ与VCR合用对人正常细胞株的细胞毒作用
    3. PPZ增强VCR诱导KB/V细胞凋亡的作用
        3.1. Hoechst 33342染色法观察细胞核形态学变化
        3.2. AnnexinV-FITC/PI双染法定量检测细胞凋亡率
        3.3. PPZ与VCR合用对细胞凋亡相关蛋白的调节
    4. PPZ与VCR合用对KB/V细胞周期分布的影响
        4.1. PPZ显著增强了VCR诱导KB/V细胞发生G2/M期阻滞的作用
        4.2. PPZ与VCR合用对细胞周期相关蛋白的调节
    5. PPZ与VCR合用抑制KB/V细胞的侵袭转移
        5.1 划痕实验检测PPZ与VCR合用对KB/V细胞迁移的抑制作用
        5.2 Transwell实验检测PPZ与VCR合用对KB/V细胞迁移、侵袭的抑制作用
        5.3 PPZ与VCR合用抑制KB/V细胞中MMP2和MMP9的表达
    6. PPZ与VCR合用对KB/V细胞P-gp功能和表达的影响
        6.1. PPZ与VCR合用对KB/V细胞内P-gp外排功能的影响
        6.2. PPZ与VCR合用对KB/V细胞中P-gp蛋白表达的影响
    7. PPZ对KB/V细胞无明显抑酸作用
        7.1 PPZ对KB/V细胞胞外pH无明显碱化作用
        7.2 PPZ对KB/V细胞中V-ATPase蛋白表达无明显抑制作用
        7.3 V-ATPase抑制剂增强PPZ与VCR合用对KB/V细胞的协同生长抑制作用
    9. PPZ与VCR合用抑制KB/V细胞中的EGFR/MAPK和PI3K/Akt/ mTOR信号通路
        9.1 PPZ与VCR合用抑制KB/V细胞中的EGFR/MAPK信号通路
        9.2 PPZ与VCR合用抑制KB/V细胞中的PI3K/Akt/mTOR信号通路
    10. PPZ增强VCR对小鼠体内KB/V细胞移植瘤的生长抑制作用
        10.1 PPZ增强VCR对KB/V细胞移植瘤的生长抑制作用
        10.2 PPZ和VCR合用对KB/V移植瘤凋亡相关蛋白的表达调节
讨论
结论
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3495086