HDAC靶向抑制剂N2E的抗肝纤维化作用及其机制研究
发布时间：2021-11-17 09:14
目的:小分子化合物N2E（N-（2-乙氧基苯基）-N’-羟基辛二酰胺）是SAHA的同源异羟肟酸衍生物,对HDAC的抑制作用较SAHA强。本实验将应用于治疗肝纤维化的相关研究,评价N2E的治疗肝纤维化作用效果,阐明其可能的作用机制,为今后的药物研究打下一定的实验和理论基础。方法:1.N2E抗动物肝纤维化模型实验:C57小鼠70只,随机均分7组,即阴性对照组、肝纤维化模型组、N2E三个剂量治疗组（10mg/kg、20 mg/kg、40mg/kg）、阳性药物对照组SAHA（40mg/kg）以及阳性药物对照组水飞蓟宾（40mg/kg）。除阴性对照组外,其它组小鼠腹腔注射20%CCl4,每周2次,持续6周,同时治疗组隔天同体积灌胃给药,直至6周实验结束停止给药。实验结束后24h,收集血样,检测其血清ALT、AST的活力;收集肝脏标本,检测肝组织的羟脯氨酸水平以及通过组织病理观察、天狼星红染色观察肝纤维化的情况;通过免疫组化检测肝纤维化进程。2.流式细胞仪检测N2E对细胞周期和凋亡的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测N2E诱导LX-2细胞凋亡的作用;再通过线粒...
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β1信号通路
图 1-1 N2E 对肝损伤的保护作用(HE 染色×200)1.3.2 天狼星红染色肝组织，观察 N2E 对小鼠肝纤维化模型胶原纤维的作用天狼星红苦味酸染色法通过胶原纤维聚集及蛋白排列异常缠绕螺旋的特点，在用于观察肝纤维化发生与演变进程中起到重要作用。在光学显微镜下，可以根据显示出胶原纤维(显红色)来判断肝纤维化的程度。结果显示，模型组(CCl4)纤维化严重的，N2E 组纤维化明显减轻，见图 1-2.A。Image J 软件以及 GraphpadPrism6 对其天狼星红染色后胶原纤维含量进行统计学处理，与正常组比较，N2E组的胶原纤维含量已经接近正常水平，具有良好的抗纤维化作用，见图 1-2.B。
18图 1-2 N2E 抗肝脏纤维化作用(天狼星红染色)（图 A 为天狼星红染色结果×200，B 为 N2E 对肝脏胶原纤维含量的影响，*p<0.01，***p<0.0001，vs.CCl4。)1.3.3 检测血清 ALT、AST 活力，观察 N2E 对小鼠肝纤维化模型的肝功能保护作用ALT 与 AST 是检测肝功能的指标，以血清转氨酶的含量作为检测指标，肝脏功能以及肝损伤的情况能够通过其简单且直观地提示，其中谷丙转氨酶(ALT)是最常用的敏感指标，1%的肝细胞发生坏死时，血清 ALT 水平即可升高一倍。实验结果如表 1，与空白组（25.1U/L）比较，模型组小鼠的模型组血清 ALT(262.2U/L)活力升高且具有显著性差异（p＜0.001），与模型组相比，N2E 三个剂量组和阳性药物对照组血清的 ALT 活力降低均具有显著性差异(p＜0.001），而 N2E
【参考文献】：
期刊论文
[1]Histone Deacetylase 3 Inhibitor Suppresses Hepatitis C Virus Replication by Regulating Apo-A1 and LEAP-1 Expression[J]. Yuan Zhou,Qian Wang,Qi Yang,Jielin Tang,Chonghui Xu,Dongwei Gai,Xinwen Chen,Jizheng Chen. Virologica Sinica. 2018(05)
[2]PDGF-BB对大鼠肝星状细胞T6增殖及细胞外基质的影响[J]. 曹媛,陈杰,夏延哲,许晨舒,陈孝. 今日药学. 2013(04)
[3]中国肝脏病学现状及发展方向[J]. 贾继东,魏来,庄辉. 中国病毒病杂志. 2011(01)
[4]血小板衍生生长因子及其受体在肝纤维化患者肝组织中的表达及意义[J]. 袁农,王萍,王宪智,王茁. 中华肝脏病杂志. 2002(01)
本文编号：3500609
【文章来源】：广东药科大学广东省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
TGF-β1信号通路
图 1-1 N2E 对肝损伤的保护作用(HE 染色×200)1.3.2 天狼星红染色肝组织，观察 N2E 对小鼠肝纤维化模型胶原纤维的作用天狼星红苦味酸染色法通过胶原纤维聚集及蛋白排列异常缠绕螺旋的特点，在用于观察肝纤维化发生与演变进程中起到重要作用。在光学显微镜下，可以根据显示出胶原纤维(显红色)来判断肝纤维化的程度。结果显示，模型组(CCl4)纤维化严重的，N2E 组纤维化明显减轻，见图 1-2.A。Image J 软件以及 GraphpadPrism6 对其天狼星红染色后胶原纤维含量进行统计学处理，与正常组比较，N2E组的胶原纤维含量已经接近正常水平，具有良好的抗纤维化作用，见图 1-2.B。
18图 1-2 N2E 抗肝脏纤维化作用(天狼星红染色)（图 A 为天狼星红染色结果×200，B 为 N2E 对肝脏胶原纤维含量的影响，*p<0.01，***p<0.0001，vs.CCl4。)1.3.3 检测血清 ALT、AST 活力，观察 N2E 对小鼠肝纤维化模型的肝功能保护作用ALT 与 AST 是检测肝功能的指标，以血清转氨酶的含量作为检测指标，肝脏功能以及肝损伤的情况能够通过其简单且直观地提示，其中谷丙转氨酶(ALT)是最常用的敏感指标，1%的肝细胞发生坏死时，血清 ALT 水平即可升高一倍。实验结果如表 1，与空白组（25.1U/L）比较，模型组小鼠的模型组血清 ALT(262.2U/L)活力升高且具有显著性差异（p＜0.001），与模型组相比，N2E 三个剂量组和阳性药物对照组血清的 ALT 活力降低均具有显著性差异(p＜0.001），而 N2E
【参考文献】：
期刊论文
[1]Histone Deacetylase 3 Inhibitor Suppresses Hepatitis C Virus Replication by Regulating Apo-A1 and LEAP-1 Expression[J]. Yuan Zhou,Qian Wang,Qi Yang,Jielin Tang,Chonghui Xu,Dongwei Gai,Xinwen Chen,Jizheng Chen. Virologica Sinica. 2018(05)
[2]PDGF-BB对大鼠肝星状细胞T6增殖及细胞外基质的影响[J]. 曹媛,陈杰,夏延哲,许晨舒,陈孝. 今日药学. 2013(04)
[3]中国肝脏病学现状及发展方向[J]. 贾继东,魏来,庄辉. 中国病毒病杂志. 2011(01)
[4]血小板衍生生长因子及其受体在肝纤维化患者肝组织中的表达及意义[J]. 袁农,王萍,王宪智,王茁. 中华肝脏病杂志. 2002(01)
本文编号：3500609
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