PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在纳米氧化锌致SH-SY5Y细胞毒性中的保护作用研究
发布时间：2022-01-13 09:52
目的:纳米氧化锌广泛应用于生物医药领域,其颗粒引起的神经毒性越来越得到重视。本研究以SH-SY5Y为细胞模型,通过比较三种不同粒径的纳米氧化锌（10 nm、50 nm、100 nm）的细胞毒性差异,选取毒性最大的50 nm纳米氧化锌用作后续的毒性机制研究,采用多种分子生物学技术,对自噬和线粒体自噬在纳米氧化锌诱导的细胞毒性机制中是否参与以及起何种作用进行了初步探讨,并进一步研究纳米氧化锌的毒性作用机制,以期为纳米氧化锌的生物安全性研究提供一定的理论依据。方法:1.通过CCK-8法、LDH释放实验检测纳米氧化锌对SH-SY5Y细胞的毒性作用。利用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况。Western blot观察纳米氧化锌对SH-SY5Y细胞caspase9、caspase3、bcl-2、bax蛋白表达水平的影响。2.通过免疫荧光法观察纳米氧化锌对SH-SY5Y细胞LC3蛋白表达的影响。Western blot观察纳米氧化锌对SH-SY5Y细胞P62、LC3、Beclin 1等自噬相关蛋白表达水平的影响。通过CCK-8、流式观察自噬抑制剂3-MA、自噬激动剂雷帕霉素对纳...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
0nm、50nm、100nm纳米氧化锌对SH-SY5Y细胞毒性作用(A：CCK-8；B：LDH)
图 1-2 纳米氧化锌诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡的流式分析。exin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率的结果；B：细胞凋亡率的统计结果（**P<0.01 表示与对照组对比有显著差异，所有的实验平行重复 3 次）氧化锌可诱导 SH-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡-3所示，纳米氧化锌处理SH-SY5Y细胞后，可上调细胞内cleaved capase9 和 bax 的表达，同时下调细胞内 bcl-2 的表达水平，说明纳米-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡。
**P<0.01 表示与对照组对比有显著差异，所有的实验平行重复 3 次）2.3 纳米氧化锌可诱导 SH-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡如图1-3所示，纳米氧化锌处理SH-SY5Y细胞后，可上调细胞内cleaved caspase3、cleaved caspase9 和 bax 的表达，同时下调细胞内 bcl-2 的表达水平，说明纳米氧化锌可诱导 SH-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡。
【参考文献】：
期刊论文
[1]纳米氧化锌对小胶质瘤BV2细胞炎症因子及p38MAPK蛋白磷酸化的影响[J]. 梁晓瑜,张小强,张妍,刘静,王旭. 环境与职业医学. 2018(05)
[2]线粒体质量控制失调与恶性肿瘤发生和发展相关性的研究进展[J]. 刘瑶,贺兴波,郑弘毅,黄才斌. 生物化学与生物物理进展. 2018(05)
[3]基于纳米氧化锌的智能药物载体[J]. 黄啸,陈春,易彩霞,郑曦. 生物医学工程学杂志. 2018(02)
[4]PINK1/parkin通路调控线粒体自噬机制的研究进展[J]. 郎秀娟,王燕. 微生物与感染. 2018(02)
[5]Pink1/Parkin介导的线粒体自噬分子机制[J]. 汤友静,牛玉娜,王辉. 中国细胞生物学学报. 2017(07)
[6]精子中线粒体的功能和命运[J]. 贺斌,郭会朵,赵茹茜. 石河子大学学报(自然科学版). 2017(02)
[7]纳米材料神经毒性研究进展[J]. 纪乐,吴涛,刘东杰,张志强,杨静,杨通旺,张博闻,吴刚. 中国职业医学. 2017(02)
[8]纳米氧化锌在食品领域中的应用及安全性研究进展[J]. 何星平,杨鹏飞,况慧娟,许恒毅. 食品安全质量检测学报. 2016(11)
[9]纳米氧化锌毒性效应及毒理学机制研究进展[J]. 赵琳,陈瑞,陈锋,龙鼎新,陈春英. 毒理学杂志. 2016(02)
[10]纳米氧化锌对HEK293细胞的毒性作用研究[J]. 陈玉莹,韩宏岩. 生物学杂志. 2016(01)
博士论文
[1]线粒体自噬功能异常在纳米氧化锌致人舌癌细胞CAL 27毒性中的作用[D]. 王剑锋.南方医科大学 2018
[2]PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在纳米氧化锌致BV-2细胞毒性中的作用研究[D]. 魏利敏.南方医科大学 2017
[3]DNM1L蛋白介导的线粒体自噬在镉致肝脏毒性中的作用研究[D]. 皮会丰.第三军医大学 2015
[4]氯化镍暴露神经毒性与线粒体功能障碍的关系研究[D]. 何旻蒂.第三军医大学 2013
硕士论文
[1]昆布多糖纳米硒的制备及其对人肝癌细胞的生长抑制作用研究[D]. 崔东晓.山西医科大学 2018
[2]新型苯并噁唑酮衍生物W3D对LPS诱导的RAW264.7细胞抗炎活性及其作用机制的研究[D]. 罗捷然.山西医科大学 2018
[3]强心活力方对慢性心衰大鼠心肌MMP-1、MMP-9表达及心室重构的影响[D]. 李文佳.长春中医药大学 2018
[4]血管紧张素Ⅱ对足细胞自噬的影响及机制研究[D]. 高雪静.第三军医大学 2014
本文编号：3586194
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
0nm、50nm、100nm纳米氧化锌对SH-SY5Y细胞毒性作用(A：CCK-8；B：LDH)
图 1-2 纳米氧化锌诱导 SH-SY5Y 细胞凋亡的流式分析。exin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡率的结果；B：细胞凋亡率的统计结果（**P<0.01 表示与对照组对比有显著差异，所有的实验平行重复 3 次）氧化锌可诱导 SH-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡-3所示，纳米氧化锌处理SH-SY5Y细胞后，可上调细胞内cleaved capase9 和 bax 的表达，同时下调细胞内 bcl-2 的表达水平，说明纳米-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡。
**P<0.01 表示与对照组对比有显著差异，所有的实验平行重复 3 次）2.3 纳米氧化锌可诱导 SH-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡如图1-3所示，纳米氧化锌处理SH-SY5Y细胞后，可上调细胞内cleaved caspase3、cleaved caspase9 和 bax 的表达，同时下调细胞内 bcl-2 的表达水平，说明纳米氧化锌可诱导 SH-SY5Y 细胞发生线粒体途径介导的凋亡。
【参考文献】：
期刊论文
[1]纳米氧化锌对小胶质瘤BV2细胞炎症因子及p38MAPK蛋白磷酸化的影响[J]. 梁晓瑜,张小强,张妍,刘静,王旭. 环境与职业医学. 2018(05)
[2]线粒体质量控制失调与恶性肿瘤发生和发展相关性的研究进展[J]. 刘瑶,贺兴波,郑弘毅,黄才斌. 生物化学与生物物理进展. 2018(05)
[3]基于纳米氧化锌的智能药物载体[J]. 黄啸,陈春,易彩霞,郑曦. 生物医学工程学杂志. 2018(02)
[4]PINK1/parkin通路调控线粒体自噬机制的研究进展[J]. 郎秀娟,王燕. 微生物与感染. 2018(02)
[5]Pink1/Parkin介导的线粒体自噬分子机制[J]. 汤友静,牛玉娜,王辉. 中国细胞生物学学报. 2017(07)
[6]精子中线粒体的功能和命运[J]. 贺斌,郭会朵,赵茹茜. 石河子大学学报(自然科学版). 2017(02)
[7]纳米材料神经毒性研究进展[J]. 纪乐,吴涛,刘东杰,张志强,杨静,杨通旺,张博闻,吴刚. 中国职业医学. 2017(02)
[8]纳米氧化锌在食品领域中的应用及安全性研究进展[J]. 何星平,杨鹏飞,况慧娟,许恒毅. 食品安全质量检测学报. 2016(11)
[9]纳米氧化锌毒性效应及毒理学机制研究进展[J]. 赵琳,陈瑞,陈锋,龙鼎新,陈春英. 毒理学杂志. 2016(02)
[10]纳米氧化锌对HEK293细胞的毒性作用研究[J]. 陈玉莹,韩宏岩. 生物学杂志. 2016(01)
博士论文
[1]线粒体自噬功能异常在纳米氧化锌致人舌癌细胞CAL 27毒性中的作用[D]. 王剑锋.南方医科大学 2018
[2]PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在纳米氧化锌致BV-2细胞毒性中的作用研究[D]. 魏利敏.南方医科大学 2017
[3]DNM1L蛋白介导的线粒体自噬在镉致肝脏毒性中的作用研究[D]. 皮会丰.第三军医大学 2015
[4]氯化镍暴露神经毒性与线粒体功能障碍的关系研究[D]. 何旻蒂.第三军医大学 2013
硕士论文
[1]昆布多糖纳米硒的制备及其对人肝癌细胞的生长抑制作用研究[D]. 崔东晓.山西医科大学 2018
[2]新型苯并噁唑酮衍生物W3D对LPS诱导的RAW264.7细胞抗炎活性及其作用机制的研究[D]. 罗捷然.山西医科大学 2018
[3]强心活力方对慢性心衰大鼠心肌MMP-1、MMP-9表达及心室重构的影响[D]. 李文佳.长春中医药大学 2018
[4]血管紧张素Ⅱ对足细胞自噬的影响及机制研究[D]. 高雪静.第三军医大学 2014
本文编号：3586194
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