利拉鲁肽通过PI3K/Akt和MAPK/ERK通路促进心肌微血管内皮细胞的增殖和迁移

发布时间：2022-01-16 21:00

　　目的研究胰高血糖素样肽-1类似物利拉鲁肽对原代大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）增殖和迁移的影响及其机制。方法使用双酶消化法体外分离培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,差速贴壁法进行纯化,CD31和Ⅷ因子抗体进行免疫细胞化学染色鉴定。采用不同浓度利拉鲁肽（0¹000 nmol/L）干预1代细胞,MTT绘制细胞生长曲线,Western blot检测利拉鲁肽对PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的激活作用,Brd U荧光标记法和划痕实验观察药物作用下细胞增殖和迁移能力,并使用相应的通路阻断剂LY294002和PD98059来进一步证实。结果体外分离原代CMECs,CD31及Ⅷ因子免疫荧光染色示双阳性率大于95%,MTT示细胞于种植48 h后进入对数生长期,利拉鲁肽以浓度依赖方式促进CMECs的体外增殖,100 nmol/L为其最适生长浓度（P<0.05）。予以100 nmol/L利拉鲁肽预干预细胞24 h后,Western blot显示胞内Akt和ERK磷酸化水平与正常细胞组相比有明显升高（P<0.05）,加入相应通路阻断剂LY294002和PD98059... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2015,35(09)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1材料和方法
    1.1试剂和仪器
    1.2实验方法
2结果
    2.1微血管内皮细胞原代培养的形态学观察
    2.2微血管内皮细胞的鉴定
    2.3不同浓度利拉鲁肽对细胞增殖能力影响
    2.4利拉鲁肽对内皮细胞PI3K/Akt和MAPK/ERK通路的影响
    2.5利拉鲁肽对细胞增殖能力影响
    2.6利拉鲁肽对细胞迁移能力影响
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]类表皮生长因子域7通过ERK信号通路促进内皮细胞迁移及血管生成[J]. 曹玉净,吕秋霞.  中华病理学杂志. 2015 (04)



本文编号：3593412