黔北地区放线菌分离及抗MRSA次级代谢产物发现

发布时间：2022-02-14 23:58

　　目的:收集来源于黔北地区特殊生境土壤中的放线菌进行分离鉴定,发掘潜力菌株与新型菌株,为开发新型抗生素及活性次级代谢产物提供基因资源和放线菌种;对贵州特殊生境梵净山来源链霉菌分离菌株Streptomyces sp.FJS 31-2菌株的次级代谢产物进行发酵,分离、纯化,以期获得结构新颖的活性次级代谢产物。方法:采集黔北地区凤凰山、大板水、四洞沟和佛光岩等未经人为破坏的特殊生境中的土样,利用GYM培养基、自来水琼脂培养基和ISP2,分离并纯化单菌落;利用基因筛选和活性筛选相结合的方式筛选分离菌株抗MRSA的活性;对发酵产物进行活性测试,并借助高效液相对菌株活性部位的范围进一步缩小;采取大规模发酵、萃取、正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析及高效液相制备色谱法等手段分离、纯化目标化合物。结果:分离纯化获得318株分离菌株,并筛选出一批拥有良好抗MRSA活性的菌株。此外通过对已知菌株16s RNA系统进化分析,发现新菌株12株;对其中99余株活性菌株进行了基因筛选和抗性测试;从链霉菌Streptomyces sp.FJS 31-2中分离得到两个单体化合物。结论:16S ... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1分离菌株抗MRSA活性分析

医学院硕士学位论文 林楠2 抗 MRSA 活性菌株 16s rRNA 系统进化分析根据形态初步筛选后选取赤水赤水佛光岩、赤水红石野谷、赤水四水沟、大和凤凰山等地区的 99 株放线菌形态的具有抗 MRSA 活性菌株进行了 16A 基因序列分析。将 PCR 产物测序结果在 NCBI 上通过 Blast 在线比对[18]， MEGA5.0 软件同时根据活性测试结果进行系统进化树的分析，可见这些不源的抗 MRSA 活性菌株可聚类为 5 大类群，而分离菌株 Streptomyces spS8-9 则聚类在所有类群之外（图 2），与已发表分离菌株 A. sp. A23 聚类在一

凝胶电泳检测，PKSⅠ基因呈初步从 64 株分离菌株中筛PCR 扩增产物测序结果聚类PKSⅠ 天 然 产 物 的 放 线 eptomyces. blastmyceticus NBRAB431752.1)和 Streptomyces sM1 2 3 4 5 6 7 8 9bp

【参考文献】：
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本文编号：3625501