核酸适配体修饰的壳聚糖-氟尿嘧啶载药体系的制备、表征与抗肝癌作用研究

发布时间：2022-02-16 10:46

　　肝细胞癌（HCC）在原发性肝癌中占了将近90%的高比例,严重危害人类健康。核酸适配体（AP）是一种全新的识别分子,目前用途很广泛。本课题采取了化学偶联和物理包埋两种合成方法将核酸适配体（AP）修饰到实验室前期合成的壳聚糖-氟尿嘧啶（CS-FUA）上。利用市售的在5’端修饰有羧基（-COOH）的AP与含有氨基（-NH₂）的壳聚糖分子通过氨基与羧基的酰胺缩合反应,成功制备化学偶联的核酸适配体-壳聚糖-氟尿嘧啶（AP-（CS-FUA））。利用CS-FUA自身的丰富氨基携带正电荷,与修饰了羧基（-COOH）的AP的负电荷进行静电结合,成功合成静电吸附的核酸适配体/壳聚糖-氟尿嘧啶（（CS-FUA）/AP）,并对其进行理化性质表征、生物安全性与抗肝癌作用等进行研究,具体研究如下:首先分别采用市售的在5’端修饰有羧基（-COOH）的AP与含有氨基（-NH₂）的壳聚糖分子通过氨基与羧基的酰胺缩合反应,成功制备化学偶联的核酸适配体-壳聚糖-氟尿嘧啶（AP-（CS-FUA））。利用CS-FUA自身的丰富氨基携带正电荷,与修饰了羧基（-COOH）的AP的负电荷进... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 AP-(CS-FUA)与 (CS-FUA)/AP载药体系的制备与理化特性表征
    2.1 主要材料与试剂
    2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 主要溶液与前药的配制
        2.3.2 AP-(CS-FUA)的合成
        2.3.3 (CS-FUA)/AP的合成
        2.3.4 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的粒径与电位测定
        2.3.5 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的载药量测定
        2.3.6 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP内 AP的包封率测定
        2.3.7 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的稳定性研究
    2.4 实验结果与讨论
        2.4.1 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的粒径和电位
        2.4.2 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的载药量
        2.4.3 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP中 AP的包封率
        2.4.4 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的稳定性
    2.5 小结
第3章 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP生物安全性评价
    3.1 主要材料与试剂
    3.2 主要仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 主要试剂的配置
        3.3.2 MTT法检测细胞存活率
        3.3.3 溶血性实验
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP对 L02 细胞的细胞毒性
        3.4.2 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的溶血性
    3.5 小结
第4章 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP的体外抗肿瘤作用和靶向性研究
    4.1 主要材料与试剂
    4.2 主要仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 MTT法检测细胞存活率
        4.3.2 流式细胞术测定摄取情况
        4.3.3 荧光倒置显微镜观察药物摄取
    4.4 结果与讨论
        4.4.1 MTT法检测细胞存活率
        4.4.2 流式细胞术测定摄取情况
        4.4.3 荧光倒置显微镜检测药物摄取
    4.5 小结
第5章 AP-(CS-FUA)和 (CS-FUA)/AP体内抗肿瘤作用与器官损伤研究
    5.1 主要材料与试剂
    5.2 主要实验仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 体内抗肿瘤作用研究
        5.3.2 体内器官损伤研究
        5.3.3 数据统计学分析
    5.4 实验结果与讨论
        5.4.1 体内抗肿瘤作用研究
        5.4.2 体内器官损伤研究
    5.5 小结
第6章 结论
参考文献
综述
    参考文献
作者攻读学位期间的科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]一种结合SELEX与二代测序技术筛选RNA结合蛋白特异识别序列新方法的建立[J]. 张璐,徐晋暤,麻锦彪.  生物工程学报. 2016(07)



本文编号：3627827