胆碱能M受体调控细胞周期蛋白依赖性激酶5及其在敌敌畏诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用

发布时间：2022-08-10 10:01

　　目的研究胆碱能M受体（主要为M1受体）参与SH-SY5Y细胞周期依赖性蛋白激酶5（Cdk5）调控及其在敌敌畏（DDVP）诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用。方法①应用免疫荧光结合共聚焦显微镜检测胆碱能M1受体及Cdk5在SH-SY5Y细胞中的分布和表达。②细胞对照组、氧化震颤素（Oxo-M）组(1×10^-4mol·L^-1作用48 h)、罗考唯亭（Rosc）组(培养结束前1 h加入Rosc 1×10^-4mol·L^-1)、Rosc+Oxo-M组(Rosc 1×10^-4mol·L^-1预处理1 h后,再加入Oxo-M 1×10^-4mol·L^-1作用至48 h),应用MTT比色法检测细胞存活率,Western印迹法检测Cdk5表达。③细胞对照组、DDVP组(1×10^-5mol·L^-1作用48 h)、Rosc组(培养结束前1 h加入1×10^-4mol·L<... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞、药物和主要试剂
    1.2 主要仪器
    1.3 细胞培养
    1.4 细胞免疫荧光法检测细胞Cdk5和M1蛋白表达
    1.5 MTT法检测细胞存活率
    1.6 AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率
    1.7 TUNEL检测细胞凋亡
    1.8 Western印迹法检测Cdk5的表达
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 胆碱能M受体和Cdk5均在SH-SY5Y细胞中表达
    2.2 Oxo-M过度激活胆碱能M受体诱导的SH-SY5Y细胞损伤
        2.2.1 Oxo-M对SH-SY5Y细胞存活率的影响
        2.2.2 Oxo-M对SH-SY5Y细胞Cdk5表达的影响
    2.3 Rosc减轻Oxo-M诱导的SH-SY5Y细胞损伤
        2.3.1 Rosc对SH-SY5Y细胞Cdk5表达的影响
        2.3.2 Rosc对Oxo-M诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响
        2.3.3 Rosc对Oxo-M诱导的SH-SY5Y细胞Cdk5表达的影响
    2.4 DDVP诱导SH-SY5Y细胞损伤并上调Cdk5表达
        2.4.1 DDVP对SH-SY5Y细胞存活率的影响
        2.4.2 DDVP对SH-SY5Y细胞Cdk5表达的影响
    2.5 Rosc可降低DDVP诱导的SH-SY5Y细胞损伤
        2.5.1 Rosc对DDVP诱导的细胞损伤的影响
        2.5.2 Rosc对DDVP诱导的SH-SY5Y细胞Cdk5表达的影响
    2.6 Rosc减轻DDVP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡
3 讨论



本文编号：3673434