低分子肝素对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

发布时间：2022-10-05 23:17

　　目的研究低分子肝素（LMWH）对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其对微小RNA-409-3p（miR-409-3p）/核糖核苷酸还原酶调节亚基M2（RRM2）分子轴的调控作用。方法体外培养宫颈癌细胞HCC94,实验分为对照组（正常培养细胞）和低、中、高剂量实验组(LMWH-L,LMWH-M,LMWH-H组,LMWH浓度为25,50,100 U·mL^-1)、miR-NC组（转染阴性对照）、miR-409-3p组（转染miR-409-3p mimics）、LMWH+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC,LMWH浓度为100 U·mL^-1)、LMWH+anti-miR-409-3p组(转染anti-miR-409-3p,LMWH浓度为100 U·mL^-1)。以噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡率;以实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）与蛋白质印迹法（Western blot）分别检测miR-409-3p、RRM2的表达量;以双荧光素酶报告实验验证miR-409-3p与RRM2的靶向关... 

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料与试剂
    2 方法
        2.1 实验分组与细胞培养[4]
        2.2 主要观察指标
            2.2.1 以MTT检测细胞增殖情况[5]
            2.2.2 以流式细胞术检测细胞凋亡率[6]
            2.2.3 以实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞中miR-409-3p、RRM2 mRNA的表达水平[7]
        2.3 次要观察指标
            2.3.1 双荧光素酶报告基因检测miR-409-3p的靶基因[8]
            2.3.2 以蛋白质印迹(Western blot)法检测RRM2、Ki-67、PCNA、Bcl-2、Bax蛋白表达[9]
    3 统计学处理
结 果
    1 LMWH对HCC94细胞增殖的影响
    2 LMWH对HCC94细胞凋亡的影响
    3 LMWH对HCC94细胞中miR-409-3p、RRM2 mRNA表达量的影响
    4 miR-409-3p过表达对HCC94细胞增殖及凋亡的影响
    5 miR-409-3p靶向调控RRM2
    6 干扰miR-409-3p可减弱LMWH对HCC94细胞增殖及凋亡的作用
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-142-3p通过调控ELAVL1表达影响过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的分子机制[J]. 邴森,袁博,王昌育,万毅,王利,邹金国.  中华细胞与干细胞杂志(电子版). 2019(03)
[2]MTT法检测钛酸钡涂层对小鼠成纤维细胞L929增殖率的影响[J]. 郭晓瑨,吴文慧,刘静亚,胡大艳,陈乃玲.  实用口腔医学杂志. 2016(05)
[3]姜黄素对肝星状细胞MyD88蛋白表达及细胞凋亡的影响[J]. 宋慧东,叶国荣,罗国彪,欧阳鹏,舒建昌.  中国临床研究. 2016(09)
[4]Nfic基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-20a靶向关系的验证[J]. 王珊,李晓霞,周杰,王宝利.  天津医药. 2016(09)
[5]膀胱癌相关蛋白对宫颈癌细胞的影响及其在细胞周期信号传导网络中的作用[J]. 谢秋娴,郑曼佳,谢昭雄,陈婵玉,丁淼.  广东医学. 2016(01)
[6]低分子肝素对人乳腺癌细胞MCF-7侵袭抑制实验研究[J]. 庞新,王鹏.  河北医科大学学报. 2013 (06)
[7]低分子肝素对A431细胞株生物学行为的干预研究[J]. 冯新,曹一鑫,王建力,陈莉.  中华皮肤科杂志. 2012 (08)
[8]低分子肝素对种植性乳腺癌生长和转移的抑制作用[J]. 刘飞,李汉军,李介秋,汤恢焕,刘庚勋,葛健君,孔屏.  中华实验外科杂志. 2010 (01)



本文编号：3686689