2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物的合成及抗白血病活性的线粒体机制研究

发布时间：2023-02-06 10:23

　　人急性髓性白血病（AML）的发生与发展都与线粒体功能异常和线粒体DNA（mtDNA）突变有关。1,4-萘醌衍生物是一类重要的抗癌分子,其在细胞内的主要作用靶点是核DNA。然而,它们对mtDNA的作用还很少被研究。我们前期研究发现2-氯-1,4-萘醌具有显著的抗白血病活性。因此,本论文以2-氯-1,4-萘醌为先导结构,研究内容如下:1.目标化合物的合成:在先导结构的C-3位引入烷基侧链和氮烷基侧链,苯环引入连三甲氧基,我们合成了6个衍生物。2.目标化合物抗细胞增殖活性评价（MTT法）:我们测定了目标化合物对HL-60细胞（急性髓性白血病细胞）和正常细胞WI-38（人胚肺成纤维细胞）的抗细胞增殖活性。结果表明,化合物18活性最好(IC₅₀=2.85μM)和选择性指数（SI=8.07）较高。3.化合物18诱导mt DNA损伤和线粒体功能障碍:18引发HL-60细胞的S期明显阻滞和G2/M期的轻度阻滞,结果提示细胞可能存在mtDNA损伤。WB结果表明,18降低mtDNA转录因子A和mtDNA特异性聚合酶γ的蛋白表达量,证实了mtDNA损伤的存在。18对于HL-60ρ

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Graphical abstract
Abstract
第一章 综述
    1.1 引言
    1.2 1,4-萘醌类化合物抗肿瘤活性研究
        1.2.1 胡桃醌的抗肿瘤活性
        1.2.2 白花丹素的抗肿瘤活性
        1.2.3 拉帕醌的抗肿瘤活性
        1.2.4 指甲花醌的抗肿瘤活性
        1.2.5 甲萘醌 (维生素k)的抗肿瘤活性
    1.3 线粒体与急性髓性白血病的关系
        1.3.1 线粒体氧化磷酸化与急性髓性白血病的关系
        1.3.2 线粒体能量代谢与急性髓性白血病的关系
        1.3.3 细胞应激与线粒体物质代谢对急性髓性白血病的影响
        1.3.4 线粒体作为抗急性髓性白血病药物的新靶点
    1.4 抗急性髓性白血病药物的研究进展
        1.4.1 阿糖胞苷
        1.4.2 全反式维甲酸和三氧化二砷
        1.4.3 米哚妥林
        1.4.4 恩西地平
        1.4.5 CPX-351和吉妥单抗奥佐米星
第二章 实验部分
    2.1 试剂和仪器
        2.1.1 试剂
        2.1.2 仪器
    2.2 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物的合成
        2.2.1 合成路线
        2.2.2 合成方法
    2.3 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物的细胞毒活性测定
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 抗细胞增殖活性的测定
    2.4 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物诱导mtDNA损伤的测定
        2.4.1 细胞周期
        2.4.2 Westernblot检测mt-TFA和DNApoly-γ蛋白表达
        2.4.3 mtDNA损伤细胞的构建与鉴定
    2.5 2-氯-3烷基-1,4-萘醌衍生物诱导线粒体损伤的测定
        2.5.1 线粒体膜电位测定
        2.5.2 细胞内ATP水平检测
    2.6 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物诱导谷胱甘肽耗竭(GSH)的测定
        2.6.1 GSH和GSSG含量测定
        2.6.2 活性氧（ROS）检测
        2.6.3 GSH含量对ROS和细胞毒活性的影响
        2.6.4 化合物18与GSH反应的紫外检测
        2.6.5 化合物18与谷胱甘肽加合物的的合成与HRMS测定
    2.7 数据统计
第三章 实验结果及讨论
    3.1 引言
    3.2 化学合成
    3.3 抗增殖活性评估
    3.4 化合物18诱导细胞周期阻滞及线粒体DNA损伤
    3.5 化合物18诱导HL-60细胞线粒体功能障碍
    3.6 化合物18诱导细胞内谷胱甘肽耗竭
    3.7 实验结果讨论
第四章 结论
    4.1 主要结论
    4.2 研究展望
参考文献
硕士期间工作与研究成果
致谢
附录



本文编号：3735821