辛伐他汀通过NF-κB通路抑制破骨细胞的分化

发布时间：2023-02-07 20:07

　　目的探讨辛伐他汀抑制破骨细胞分化的机制。方法 RAW264.7细胞培养并传代,sRANKL+M-CSF诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化;WST-1检测不同浓度辛伐他汀对破骨细胞增殖活性的影响;TRAP染色检测辛伐他汀对破骨细胞分化的影响;免疫荧光检测辛伐他汀对破骨细胞肌动蛋白环形成的影响及对通路蛋白p65细胞核内转移的影响;Western blotting检测加入辛伐他汀后对通路蛋白p65的影响。结果 WST-1结果显示,辛伐他汀(10-6 mol/L)作用24 h后明显抑制了破骨细胞的增殖活性。TRAP染色显示,成熟的破骨细胞增多核,胞浆嗜酸性,染色呈酒红色,加入辛伐他汀及核因子κB (NF-κB)通路抑制PDTC后,破骨细胞的形成及分化明显受到抑制。免疫荧光检测显示,辛伐他汀抑制破骨细胞肌动蛋白环的形成、抑制NF-κB信号通路核心蛋白p65的细胞核内转位。免疫印迹结果显示,辛伐他汀能够抑制p65的磷酸化。结论辛伐他汀通过NF-κB信号通路抑制破骨细胞的分化。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞：
        1.1.2 试剂：
        1.1.3 仪器：
    1.2 实验方法
        1.2.1 小鼠单核/巨噬细胞RAW 264.
        1.2.2 WST-1检测细胞增殖活性：
        1.2.3 TRAP染色检测破骨细胞分化：
        1.2.4 肌动蛋白检测破骨细胞吸收活性：
        1.2.5 免疫荧光检测NF-κB核转位：
        1.2.6 Western blotting检测：
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 SIM抑制RAW264.7细胞增殖活性
    2.2 破骨细胞的形态学观察
    2.3 TRAP染色检测破骨细胞分化
    2.4 SIM抑制破骨细胞的分化
    2.5 SIM抑制破骨细胞肌动蛋白环的形成
    2.6 SIM抑制NF-κB的核转位
    2.7 Westerm blotting结果
3 讨论



本文编号：3737338