ClC-3氯通道介导双硫仑/铜螯合物靶向抗鼻咽肿瘤的作用及机制

发布时间：2023-04-02 22:37

　　目的：双硫仑(DSF)作为抗酗酒药物已经有六十多年的临床应用,近几年的研究发现,双硫仑螯合二价金属阳离子后有选择性抗肿瘤的活性,然其作用机制未明。氯通道作为最重要的阴离子通道,参与细胞的增殖、凋亡、周期调控等生理及病理生理过程。我们前期研究表明,Cl C-3氯通道在鼻咽癌细胞和正常鼻咽上皮细胞中存在差异性的表达,提示氯通道可作为肿瘤诊断和干预的潜在新靶标。本实验基于双硫仑/铜(DSF/Cu)高效低毒的抗肿瘤活性,探究DSF/Cu是否具有选择性诱导鼻咽肿瘤细胞凋亡的作用,从氯通道角度探索DSF/Cu高选择性抗肿瘤作用的潜在新靶点,为研发以Cl C-3氯通道为靶向分子的抗肿瘤药提供实验依据。方法:以人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)和人永生化正常鼻咽上皮细胞(NP69-SV40T)为研究对象,1)流式细胞术检测DSF/Cu诱导CNE-2Z细胞和NP69-SV40T细胞的凋亡率;2)原子力显微镜(AFM)观察DSF/Cu诱导CNE-2Z细胞和NP69-SV40T细胞表面超微结构的变化;3)采用si RNA沉默技术下调CNE-2Z细胞Cl C-3氯通道蛋白的表达;4)荧光显微镜和流式细胞术检测...

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1. 研究背景
        1.1 双硫仑抗肿瘤作用的研究
        1.2 离子通道与肿瘤
        1.3 氯离子通道
        1.4 ClC-3 氯通道与肿瘤
    2. 研究思路、目的及意义
第二章 材料与方法
    1. 实验材料
        1.1 细胞株
        1.2 实验仪器与设备
        1.3 实验药品与试剂
    2.实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 细胞凋亡实验
        2.3 全细胞膜片钳实验
        2.4 细胞转染
        2.5 Western Blot实验
        2.6 原子力显微镜
        2.7 统计分析
第三章 结果
    第一部分 DSF/Cu在正常鼻咽上皮细胞（NP69-SV40T）和低分化鼻咽癌细胞（CNE-2Z）凋亡中的作用以及对细胞超微结构的影响
        1.1 DSF/Cu在正常鼻咽上皮细胞和低分化鼻咽癌细胞凋亡中的作用
            1.1.1 DSF/Cu呈浓度依赖性诱导鼻咽癌细胞凋亡
            1.1.2 DSF/Cu呈时间依赖性诱导鼻咽癌细胞凋亡
        1.2 DSF/Cu对低分化鼻咽癌细胞（CNE-2Z）和正常鼻咽上皮细胞（NP69-SV40T）超微结构的影响
    第二部分 ClC-3 氯通道是否参与DSF/Cu诱导的鼻咽癌细胞（CNE-2Z）凋亡
        2.1 氯通道阻断剂抑制DSF/Cu诱导的鼻咽癌细胞的凋亡
        2.2 ClC-3 氯通道在DSF/Cu诱导的鼻咽癌细胞凋亡中的作用
            2.2.1 ClC-3 氯通道蛋白在人鼻咽癌细胞(CNE-2Z)高表达
            2.2.2 DSF/Cu对鼻咽癌CNE-2Z细胞ClC-3 氯通道蛋白表达的影响
第四章 讨论
结论
参考文献
主要缩略词汇表
在校期间科研情况
致谢



本文编号：3780101