吡格列酮抑制西罗莫司靶蛋白通路促进糖尿病大鼠下肢血管新生的研究

发布时间：2023-04-20 05:39

　　目的探讨吡格列酮抑制西罗莫司靶蛋白(mTOR)通路促进糖尿病大鼠下肢血管新生的作用。方法以自发性糖尿病大鼠行右侧股动脉结扎离断术建立急性下肢缺血模型,并随机分为模型组和实验组,另取SD大鼠作为空白组。第15天时将各组大鼠处死,分离股动脉内皮细胞。空白组和模型组给予空白血清进行培养,实验组给予含15%盐酸吡格列酮血清进行培养。用逆转录聚合酶链反应检测mTOR mRNA、自噬效应蛋白(Beclin-1)mRNA、自噬相关蛋白5(Atg5)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)mRNA的表达水平,用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况。结果干预48 h后,空白组、模型组和实验组的mTOR mRNA分别为1.00±0.14,2.98±0.90和1.18±0.11,LC3 mRNA分别为1.00±0.06,0.71±0.07和0.91±0.10,Beclin-1 mRNA分别为1.00±0.28,0.72±0.16和0.93±0.17,Atg5 mRNA分别为1.00±0.18,0.75±0.19和0.97±0.19,细胞增殖情况(光密度)分别为0.80±0.02,0.59±0.01和0.72±0.03,模型组...

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 模型构建
        2.2 吡格列酮含药血清制备[5]
        2.3 动物分组与给药方法
        2.4 主要观察指标
            2.4.1 用RT-PCR检测mTOR、Beclin-1、Atg5和LC3基因的表达水平
            2.4.2 用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖
        2.5 次要观察指标
            2.5.1 用免疫荧光染色鉴定LC3蛋白
            2.5.2 用管腔结构形成实验检测管腔形成数
            2.5.3 用流式细胞术检测细胞凋亡
    3 统计学处理
结 果
    1 吡格列酮含药血清对股动脉内皮细胞中mTOR mRNA和自噬相关基因表达的影响
    2 吡格列酮含药血清对股动脉内皮细胞增殖的影响
    3 吡格列酮含药血清对自噬LC3蛋白质免疫荧光的影响
    4 吡格列酮含药血清对管腔形成数的影响
    5 吡格列酮含药血清对股动脉内皮细胞凋亡的影响
讨 论



本文编号：3794998