EGFR抑制剂WS-157和YS-67抗肿瘤作用研究

发布时间：2023-04-26 20:44

　　人表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种受体酪氨酸激酶,与许多类型的人类癌症的发展有关。目前已知,EGFR常常会发生基因扩增、激酶结构域激活突变或EGFR(EGFR vIII)胞外结构域的片段缺失等遗传改变,促进其异常激活。第一代EGFR小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKI)是ATP竞争性可逆抑制剂,通过与ATP结合位点结合来阻断EGFR诱导的下游信号传导的激活。EGFR的致癌突变占非小细胞肺癌(NSCLC)人群的10-30%,全球每年诊断出大约10-20万NSCLC病例,其中两个频繁且相互排斥的原发突变是EGFR L858R和EGFR[d746-750](氨基酸746和750之间的外显子19缺失),占所有EGFR突变NSCLC病例的约85%。第一代EGFR激酶抑制剂Geftinib(ZD1839)和Erlotinib(OSI-774)对这类突变具有良好的反应率,然而用药9-11个月左右患者常常会产生耐药,其中大约60%由外显子20的T790M点突变驱动,这种突变恢复了组成型E...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略词表
续英文缩略词表
1 前言
    1.1 EGFR在癌症中的作用
        1.1.1 EGFR发现历史
        1.1.2 EGFR结构
        1.1.3 EGFR的核定位及其功能
    1.2 癌症中EGFR的扩增和突变
        1.2.1 大片段序列缺失
        1.2.2 点突变
        1.2.3 基因扩增
    1.3 针对EGFR的癌症治疗
    1.4 抗EGFR TKIS的机制
        1.4.1 EGFR基因的二次突变
        1.4.2 替代途径的激活
        1.4.3 表型转化
        1.4.4 抗细胞凋亡
    1.5 综合治疗
        1.5.1 EGFR TKI加化疗
        1.5.2 EGFR TKI加抗血管生成药物
        1.5.3 EGFR TKI加免疫疗法
    1.6 本论文研究的思路和方案
2 WS-157 抗肿瘤作用研究
    2.1 实验材料
        2.1.1 化合物
        2.1.2 细胞
        2.1.3 实验设备
        2.1.4 实验试剂
        2.1.5 试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养相关实验
        2.2.2 细胞增殖抑制试验
        2.2.3 细胞总蛋白的提取
        2.2.4 BCA蛋白定量法
        2.2.5 Western blot实验
        2.2.6 流式细胞术检测细胞周期
        2.2.7 划痕修复实验
        2.2.8 克隆形成实验
        2.2.9 裸鼠移植瘤实验
    2.3 实验结果
        2.3.1 WS-157 体外激酶活性评价
        2.3.2 WS-157 抑制EGFR及其下游信号通路
        2.3.3 WS-157 靶点抑制作用具有可逆性
        2.3.4 WS-157 对不同来源肿瘤细胞株具有增殖抑制作用
        2.3.5 WS-157 对肿瘤细胞周期的影响
        2.3.6 WS-157 抑制肿瘤细胞克隆形成和划痕修复能力
        2.3.7 化合物WS-157对A431 裸鼠移植瘤的生长抑制作用
    2.4 讨论
3 YS-67 抗肿瘤作用研究
    3.1 实验材料和试验方法
    3.2 实验结果
        3.2.1 YS-67 体外激酶活性评价
        3.2.2 YS-67 能够抑制EGFR及其下游信号通路
        3.2.3 YS-67 靶点抑制活性的可逆性分析
        3.2.4 YS-67 对不同来源肿瘤细胞株增殖抑制作用
        3.2.5 YS-67 显著抑制肿瘤细胞克隆形成和划痕修复能力
        3.2.6 YS-67 能够抑制裸鼠移植瘤生长
    3.3 讨论
4 总结与展望
参考文献
个人简历
致谢



本文编号：3802172