曲格列酮诱导人心肌细胞氧化应激和自噬的作用

发布时间：2023-10-15 14:43

　　目的研究曲格列酮的心肌细胞毒性特征,并从线粒体氧化应激和自噬角度探讨其潜在的毒作用机制。方法人源心肌细胞AC16给予不同浓度曲格列酮0～40μmol·L^-1孵育24 h。倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞存活率,漏出法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量;荧光探针TMRM检测线粒体膜电位和CM-H₂DCFDA检测全细胞活性氧的含量;Western印迹法检测微管相关蛋白Ⅱ/Ⅰ轻链3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)比值和P62蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比,曲格列酮可浓度依赖性地引起细胞质皱缩、细胞存活率下降(r=-0.928,P<0.05)和LDH释放量增加(r=0.746,P<0.05);曲格列酮10和20μmol·L^-1可明显降低细胞线粒体膜电位(P<0.05),增加全细胞活性氧含量(P<0.05);显著增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调P62蛋白表达(P<0.05)。结论曲格列酮可引起心肌细胞损伤和线粒体功能障碍,其机制与线粒体氧化应激和自噬体降解受阻密切相关。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂和仪器
    1.2 细胞培养和分组处理
    1.3 倒置显微镜观察细胞形态
    1.4 CCK-8法检测细胞存活率
    1.5 漏出法检测LDH释放量
    1.6 高内涵活细胞成像法检测线粒体膜电位和细胞ROS含量
    1.7 Western印迹法检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和P62蛋白表达水平
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 曲格列酮对AC16细胞形态学的影响
    2.2 曲格列酮对AC16细胞存活率和LDH漏出的影响
    2.3 曲格列酮对AC16细胞线粒体膜电位的影响
    2.4 曲格列酮对AC16细胞ROS含量的影响
    2.5 曲格列酮对AC16心肌细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和P62蛋白表达的影响
3 讨论



本文编号：3854101