以AR为靶点的小分子PROTACs的设计、合成及生物活性评价

发布时间：2023-11-05 09:08

　　蛋白降解靶向嵌合体(Proteolytic targeting chimera,PROTAC)是一种新兴诱导蛋白降解技术,已在抗肿瘤药物研究领域中得到广泛应用。越来越多用来靶向降解致病蛋白的PROTAC分子被研究设计出来,因其具有高选择性、低毒性等优点,被当作潜在的抗肿瘤药物用以治疗相关疾病。前列腺癌在去势治疗后,使得部分癌细胞获得依赖低浓度雄激素生长和抵抗凋亡的能力,最终往往会发展成为去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)。在转化过程中多种分子机制导致雄激素受体(androgen receptor,AR)信号通路的再激活,促进了CRPC进展。临床上广泛使用小分子抑制剂药物治疗CRPC,但随着AR自身变异等原因,致使AR信号通路再激活呈现多样化,癌细胞对药物逐渐产生耐药性。PROTAC技术运用到前列腺癌治疗可以直接降解AR蛋白,而不是抑制AR蛋白,为解决耐药性和脱靶毒性等问题提供了新的策略。由此,本文设计并合成了用以诱导降解AR蛋白的PROTAC双功能分子,并对其生物活性进行了考察。本文将可以与CRBN系统E3泛素连接酶...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 前列腺癌
    1.2 前列腺癌的治疗方法
        1.2.1 外科手术
        1.2.2 放射治疗
        1.2.3 冷冻治疗
        1.2.4 内分泌治疗
        1.2.5 化学药物治疗
        1.2.6 免疫治疗
    1.3 雄激素受体(AR)与去势抵抗性前列腺癌(CRPC)
        1.3.1 AR的结构与功能
        1.3.2 AR的变异与CRPC的形成
    1.4 蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)技术概述
        1.4.1 泛素-蛋白酶体系统
        1.4.2 PROTAC技术基本介绍
        1.4.3 以AR为靶蛋白的PROTAC研究
    1.5 课题立题依据与意义
    1.6 课题主要研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 细胞株及其培养基配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 化学设计
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 CCK-8法检测细胞增殖实验
        2.2.4 蛋白免疫印迹法检测目标蛋白含量
        2.2.5 蛋白酶体抑制剂竞争实验
        2.2.6 细胞划痕实验
        2.2.7 细胞侵袭实验
        2.2.8 细胞凋亡相关染色实验
第三章 结果与讨论
    3.1 化学合成
        3.1.1 化学合成路线
        3.1.2 化学合成结果与表征
    3.2 PAP508能有效抑制LNCaP细胞与VCaP细胞的增殖
    3.3 PAP508对AR蛋白具有显著降解效果
    3.4 PAP508诱导的蛋白降解依赖于蛋白酶体
    3.5 PAP508对肿瘤细胞迁移与侵袭影响
        3.5.1 PAP508有效抑制LNCaP细胞的迁移
        3.5.2 PAP508有效抑制LNCaP细胞与VCaP细胞的侵袭
    3.6 PAP508对细胞凋亡的影响
        3.6.1 PAP508诱导LNCaP细胞发生凋亡
        3.6.2 PAP508对相关凋亡蛋白影响
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录1:产物质谱核磁图
附录2:作者在攻读硕士学位期间发表的论文



本文编号：3860732