光谱法研究盐酸法舒地尔-牛血清白蛋白超分子体系

发布时间：2024-02-06 22:31

　　利用光谱法研究了盐酸法舒地尔(Fasudil Hydrochloride,FSD)与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的相互作用机理。结果表明,FSD能有效猝灭BSA内源性荧光,属于静态猝灭机制。FSD与BSA结合比例约为1∶1,结合位置主要在BSA的亚螺旋域IIA中。FSD的加入导致色氨酸残基微环境的疏水性减弱,继而引起BSA的构象产生变化。通过荧光共振能量转移理论计算得到FSD与BSA之间结合距离r=4.35 nm;结合热力学参量进行分析,FSD与BSA结合的作用力类型主要是静电引力,反应是自发过程。Cu²⁺、Zn²⁺的加入降低了FSD对BSA结合亲和力,缩短了FSD在血液中的停留时间。

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【部分图文】：

图1盐酸法舒地尔(FSD)分子结构式

FSD,分子式为C14H18ClN3O2S,分子量为327.83。分子结构式如图1所示。配置成9.15×10-4mol·L-1的FSD溶液,置于4℃冷藏。将BSA溶于三重蒸馏水中,配置成1.0×10-4mol·L-1溶液,置于4℃冷藏。配置PBS缓冲液(磷酸氢二钠8.....

图2FSD-BSA的荧光猝灭光谱

图2是FSD-BSA超分子体系的荧光猝灭光谱。光谱结果显示,保持BSA含量不变,随着FSD浓度的递增,BSA的荧光发射强度降低越来越明显,这表明FSD能够猝灭BSA荧光,FSD与BSA之间产生相互作用。FSD和BSA结合没有引起BSA发射峰波长或峰型的任何变化。由此初步推断出,F....

图3FSD对BSA的荧光猝灭Stern-Volmer曲线

式(1)中,F0、F分别为BSA溶液中引入FSD药物前后的在340nm荧光强度,Kq为表观猝灭常数,[Q]为所加入的药物的总浓度,KSV为猝灭常数,τ0为BSA荧光寿命(约10-8s)。利用式(1)对BSA在340nm波长处的荧光强度进行拟合,见图3。298、308K时,....

图4不同温度下FSD与BSA的Lineweaver-Burk曲线

式(2)中KLB为静态猝灭缔合常数。不同温度下Lineweaver-Burk曲线如图4所示,所得结果列于表2中。由图4和表2可知,KLB随温度升高而降低,说明高温不利于FSD与BSA结合生成的超分子体系稳定性。表2不同温度下FSD与BSA的KLB、rTable2KLBand....

本文编号：3896299