泛素化降解靶蛋白的PROTAC嵌合体分子筛选及其构效关系分析

发布时间：2024-02-15 01:32

　　背景:蛋白水解靶向嵌合体(Proteolysis Targeting Chimera,PROTAC),利用双功能嵌合体分子同时结合靶蛋白和E3连接酶,使靶蛋白被泛素化标记,从而进入蛋白酶体途径被降解。PROTAC嵌合体分子由三部分组成:结合靶蛋白的配体、结合E3泛素连接酶的配体、以及两者之间的连接链(linker)。本文分别以CDK4/6和EGFR为靶点合成了一系列化合物,希望从中筛选出能有效降解靶蛋白的PROTAC嵌合体分子,为肿瘤靶向治疗提供候选化合物。方法:以乳腺癌靶向治疗药物CDK4/6高选择性抑制剂Palbociclib为弹头的PROTAC嵌合体分子ZM7、ZM8、ZM9分别以梯度稀释浓度处理乳腺癌细胞或急性淋巴细胞白血病细胞72h,CCK8试剂检测细胞活率;以Western Blot法检测不同给药时间和浓度条件下ZM7、ZM8、ZM9对靶蛋白CDK4和CDK6的降解作用以及CDK4/6所在信号通路中cyclin D、Rb、phospho-Rb蛋白的表达情况。以已上市药物EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)Gefitinib为弹头的PROTAC嵌合体分子ZM3、ZM4、ZM5、...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1PROTAC嵌合体分子对乳腺癌细胞株的增殖抑制作用

PROTAC嵌合体分子ZM7、ZM8、ZM9分别以0.25、0.74、2.22、6.67、20μmol/L处理细胞72h，CCK8检测PROTAC嵌合体分子对这些细胞活率的影响，并计算其IC50值（表3）。结果表明，除了SK-BR-3细胞，Palboci....

图2PROTAC嵌合体分子不同给药浓度对CDK4和CDK6蛋白的降解作用

1.4PROTAC嵌合体分子对乳腺癌细胞中CDK4/6蛋白的降解作用1.4.1PROTAC嵌合体分子不同给药浓度对乳腺癌细胞中CDK4/6蛋白的降解作用Palbociclib是CDK4/6高选择性抑制剂，在临床上主要是用于ER阳性、HER2阴性的转移性乳腺癌....

图3PROTAC嵌合体分子不同给药时间对CDK4和CDK6蛋白的降解作用1.5构效关系分析

图3PROTAC嵌合体分子不同给药时间对CDK4和CDK6蛋白的降解作用1.5构效关系分析这一系列的PROTAC嵌合体分子以乳腺癌靶向治疗药物CDK4/6高选择性抑制剂Palbociclib为弹头，以来那度胺为E3连接酶配体，以不同数量单元的linker....

图4PROTAC嵌合体分子对HAL-01细胞的增殖抑制作用

4PROTAC嵌合体分子对HAL-01细胞的增殖抑制作嵌合体分子对HAL-01细胞中CDK4/6蛋白的降C嵌合体分子不同给药浓度对HAL-01细胞中Cot结果表明，从量效关系来看，PROTAC嵌合体分子分4h后，ZM8、ZM9对CDK4有降解作....

本文编号：3898964